一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ005458 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ005458 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ005458 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Cyclin E2
中文名称:周期素E2抗体
别 名;CCN E2; CCNE 2; CCNE2; CCNE2 protein; CYC E2; CYCE 2; CYCE2; CyclinE2; G1/S-specific cyclin E2; G1/S-specific cyclin E2; CCNE2_HUMAN.
研究领域; 细胞生物 染色质和核信号 信号转导 细胞周期蛋白
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Mouse, (predicted: Human, Rat, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;44kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human Cyclin E2
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The human Cyclin E2 gene encodes a 404 amino acid protein that is most closely related to Cyclin E. Cyclin E2 mRNA levels peaks at the G1 / S transition. Cyclin E2 associates with Cdk2 in a functional kinase complex that is inhibited by both p27 (Kip1) and p21 (Cip1). Cyclin E2 / Cdk2 phosphorylates histone H1 in vitro.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
叉头蛋白F1抗体 FOXF1
Noxa蛋白抗体 Noxa
促凋亡调节蛋白BNIP3抗体 BNIP3
PE-Cy5.5标记人CD14单克隆抗体 human CD14/PE-Cy5.5
锌指蛋白100抗体 ZNF100
食品添加剂瓜含量比色法定量检测试剂盒
锌指蛋白393抗体 KLF17
胚胎干细胞中胚层(mesoderm)细胞分化荧光检测试剂盒
黑色素瘤相关抗原8抗体 MAGEA8
小鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)elisa检测试剂盒
磷酸化细胞胞浆蛋白2抗体 phospho-SLP76 (Tyr113)
大鼠胰腺再生蛋白Iα(REG1α)elisa检测试剂盒
DNA切除修复蛋白1单克隆抗体 ERCC1
大鼠ERp57 elisa检测试剂盒免费代测
C型凝集素结构域家族9成员A抗体 CLEC9A
人CC趋化因子受体2(CCR2)elisa分析检测试剂盒
磷酸化髓鞘碱性蛋白抗体 phospho-MBP (Thr232)
细胞基质金属(MMP-2)明胶法比色定量检测试剂盒
环指蛋白190抗体 RNF190
小鼠凝血因子Ⅵ(FⅥ)elisa检测试剂盒
转录因子POU2F3抗体 POU2F3
细胞线粒体复合物II蛋白表达荧光定量检测试剂盒
棕榈酰蛋白硫酯酶1抗体 PPT1
总谷胱甘肽/ 氧化型谷胱甘肽T-GSH/ GSSG测试盒 50管 分光光度法
神经纤毛蛋白2抗体 Neuropilin 2/NRP2
乙肝病毒DNA纯化试剂盒
生长因子受体结合适应蛋白抗体 GAPT
小鼠谷胱甘肽(GSH)elisa检测试剂盒
周期素E2抗体环指蛋白105抗体 RNF105 研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 G蛋白信号 组织胺H4受体抗体 HRH4/GPCR105 研究领域; 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶PGAM5抗体 PGAM5 研究领域;细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶 线粒体 PSD95结合蛋白3抗体 SAPAP3 研究领域;神经生物学 信号转导 细胞类型标志物 细胞膜蛋白