一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ009036 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ009036 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ009036 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:GRM2+GRM4
中文名称:促代谢型谷氨酸受体2+4抗体
别 名;Metabotropic Glutamate Receptor 2+4; GRM2+GRM4; GRM2 + GRM4; GRM2/GRM4; GPRC1B; GPRC1D; GRM2; GRM4; Metabotropic glutamate receptor 2; Metabotropic glutamate receptor 4; mGluR2; mGluR4; GRM2_HUMAN; GRM4_HUMAN.
神经生物学 信号转导 G蛋白偶联受体 G蛋白信号
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;102kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human GRM2+GRM4: 31-130/872
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
L glutamate is the major excitatory neurotransmitter in the central nervous system and activates both ionotropic and metabotropic glutamate receptors. Glutamatergic neurotransmission is involved in most aspects of normal brain function and can be perturbed in many neuropathologic conditions. The metabotropic glutamate receptors are a family of G protein coupled receptors, that have been divided into 3 groups on the basis of sequence homology, putative signal transduction mechanisms, and pharmacologic properties. Group I includes GRM1 and GRM5 and these receptors have been shown to activate phospholipase C. Group II includes GRM2 and GRM3 while Group III includes GRM4, GRM6, GRM7 and GRM8. Group II and III receptors are linked to the inhibition of the cyclic AMP cascade but differ in their agonist selectivities.
Receptor for glutamate. The activity of this receptor is mediated by a G protein that inhibits adenylate cyclase activity. May mediate suppression of neurotransmission or may be involved in synaptogenesis or synaptic stabilization.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
RHOA单克隆抗体 RHOA
FITC标记人CD14单克隆抗体 human CD14/FITC
SAMD13蛋白抗体 SAMD13
GSTA1单克隆抗体 GSTA1
髓鞘转录因子1激酶抗体 PKMYT1
大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(sIL-1RⅡ)elisa分析检测试剂盒
天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗体 Eukaryotic aspartyl protease
人血液球蛋白A(IgA)比浊法定量检测试剂盒
多谷氨酰胺结合蛋白1抗体 PQBP1
小鼠内皮型一氧化氮合酶3(eNOS-3)elisa检测试剂盒
甲基化组蛋白H3 (tri methyl K36) 单克隆抗体 Histone H3 (tri methyl K36)
人α-辅肌动蛋白3(ACTN-3)elisa分析检测试剂盒
4号染色体开放阅读框52抗体 C4orf52
大鼠亲环素A(CYPA)elisa检测试剂盒
20号染色体开放阅读框94抗体 C20orf94
豚鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)elisa检测试剂盒
间隙连接蛋白40抗体 Connexin-40
药品糖精(saccharin)含量紫外光谱法定量检测试剂盒
泛素蛋白连接酶D2抗体 UBE2D2
细胞DNA损伤彗星荧光检测试剂盒
血清淀粉样蛋白A样蛋白1抗体 SAAL1
细胞果糖1,6-二磷酸酶(fructose 1, 6-diphosphatase)活性比色法定量检测试剂盒
叶绿体伴侣蛋白抗体 CPN10
人高尔基蛋白73(GP-73)elisa检测试剂盒
膜相关蛋白Numb抗体 NUMB
大鼠胱抑素S(CST4)elisa分析检测试剂盒
脑胶质瘤相关蛋白抗体(锌指蛋白5) GLI1
植物(拟南芥)超氧化物歧化酶[铁],叶绿体(SODB)elisa分析检测试剂盒
促代谢型谷氨酸受体2+4抗体配体依赖核受体共抑制因子样蛋白抗体 LCORL 研究领域;细胞生物 转录调节因子 表观遗传学 G蛋白信号转导调节因子19抗体 RGS19 研究领域; 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 粘蛋白7抗体 MUC7 研究领域; 细胞生物 信号转导 细胞粘附分子 肝癌上调蛋白抗体 HURP 研究领域; 细胞周期蛋白