一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007995 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007995 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007995 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:FOXB1 + FOXB2
中文名称:叉头蛋白B1+B2抗体
别 名;FOXB1+FOXB2; FKH5; forkhead box B2; Forkhead box protein B1; Forkhead box protein B2; Transcription factor FKH 5; FOXB1_HUMAN; FOXB2_HUMAN.
研究领域;细胞生物 发育生物学 神经生物学 信号转导 转录调节因子 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;35, 45kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human FOXB1 + FOXB2: 51-100/325
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
FOXB1 and FOXB2 are winged helix/forkhead transcription factors. FOXB1 is specifically expressed in the developing central nervous system (CNS). Early embryonic FOXB1 expression is restricted to the mammiliary body region of the caudal hypothalamus, midbrain, hindbrain and spinal cord. FOXB1 may play a role in postnatal growth, lactation and CNS development.
The Forkhead-box (FOX) genes comprise a superfamily of at least 43 members that encode proteins which are involved in transcriptional regulation and may be associated with the pathogenesis of various cancers. FOXB1 (forkhead box B1), also known as FKH5 or HFKH-5, and FOXB2 (forkhead box B2) are members of the FOX family and each contain one forkhead DNA-binding domain. Both FOXB1 and FOXB2 localize to the nucleus where they are thought to function as transcription factors that can bind to DNA via their forkhead domains. In mice, defects in the gene encoding FOXB1 are associated with retarded development of the central nervous system (CNS), suggesting that FOXB1 may play a role in CNS organization and function.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
嘌呤核苷磷酸化酶抗体
胆碱酯酶抑制剂8抗体 Anti-RIC8A
Nucleoside phosphorylase
睾丸蛋白聚糖1抗体 Anti-SPOCK1/Testican 1
9号染色体开放阅读框7抗体
TIEG1 ELISA Kit
C9orf7
人胱抑素A(CSTA/STF1/STFA)elisa分析检测试剂盒
5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
大鼠TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)elisa分析检测试剂盒
谷氨酰胺转胺酶3抗体 Anti-TGM3
CSTA/STF1/STFAELISAkit
缺氧诱导基因95抗体 Anti-SESN2/Hi95
CASPASE-8蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
果糖-2,6-二磷酸酶1抗体 Anti-PFKFB1
糖果甘素(dulcin)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
平足蛋白抗体(管内皮细胞蛋白) Anti-Podoplanin Protein/gp36
小鼠补体蛋白5(C5)elisa检测试剂盒
ALAS-E
高尔基体提取试剂盒50T
鸭沙门氏菌抗体
环指蛋白191抗体
Duck salmonella
LONRF1/RNF191
核酸敏感元件结合蛋白1 Anti-YBX-1/YB1
精子成熟相关蛋白BOULE抗体
维甲酸诱导神经母细胞瘤蛋白1抗体 Anti-NAV2/RAINB1
BOULE
叉头蛋白B1+B2抗体AF750标记的磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体 phospho-IKK beta (Tyr188), Alexa Fluor 750 conjugated 产品类型磷酸化抗体 跨膜TMIGD1蛋白抗体 TMIGD1 研究领域; 细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞周期蛋白 细胞分化 α-葡萄糖苷酶C抗体 GANC 研究领域; 细胞生物 信号转导 糖尿病 新陈代谢 细胞衰老相关蛋白1抗体 SEN1 研究领域;细胞生物 细胞凋亡 转录调节因子 表观遗传学