一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ009449 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ009449 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ009449 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Complement C3
中文名称:补体C3抗体
别 名;Acylation stimulating protein cleavage product; Acylation-stimulating protein cleavage product; AHUS5; ARMD9; ASP; ASP; C3 and PZP-like alpha-2-macroglobulin domain-containing protein 1 antibody C3 antibody C3a anaphylatoxin; CO3_HUMAN; Complement C3 alpha chain; Complement C3; Complement C3 beta chain; Complement C3 precursor; Complement C3b alpha chain; Complement C3c alpha' chain fragment 2; Complement C3c fragment; Complement C3d fragment; Complement C3f fragment; Complement C3g fragment; Complement component 3; Complement component 3 precursor; Complement component C3; Complement factor 3; CPAMD1; Plp.
研究领域;细胞生物 神经生物学
抗体来源;Goat
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; (predicted: Human, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;187kDa
细胞定位;分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;human Complement C3 purified from human plasma: full length
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The complement factor C3 consists of an alpha and a beta chain. C3 is a central factor in the complement cascade. It is central to the alternative pathway that leads to the C3 convertase C3bBb. The classical mannose binding lectin activation pathway leads to the C3 convertase C4b2a. These convertases cleave C3 resulting in C3a and C3b. Further degradation leads to the formation of the alpha chain products C3d, C3g and C3c. C3 is an acute phase protein that is produced by a wide range of tissues, including renal epithelial cells and hepatocytes.
C3 plays a central role in the activation of the complement system. Its processing by C3 convertase is the central reaction in both classical and alternative complement pathways. After activation C3b can bind covalently, via its reactive thioester, to cell surface carbohydrates or immune aggregates.
Derived from proteolytic degradation of complement C3, C3a anaphylatoxin is a mediator of local inflammatory process. It induces the contraction of smooth muscle, increases vascular permeability and causes histamine release from mast cells and basophilic leukocytes.
Acylation stimulating protein (ASP): adipogenic hormone that stimulates triglyceride (TG) synthesis and glucose transport in adipocytes, regulating fat storage and playing a role in postprandial TG clearance. Appears to stimulate TG synthesis via activation of the PLC, MAPK and AKT signaling pathways. Ligand for GPR77. Promotes the phosphorylation, ARRB2-mediated internalization and recycling of GPR77.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
素Mundticin KS多肽前体抗体
RAS家族关联结构域蛋白8抗体 Anti-RASSF8
Mundticin KS precursor
乳腺癌雌诱导蛋白抗体 Anti-TFF1/BCEI
2号染色体开放阅读框49抗体
D1R ELISA Kit
C2orf49
山羊促甲状腺素(TSH)elisa分析检测试剂盒
宫颈癌抑癌蛋白5/锌指蛋白434抗体
大鼠多巴胺D1受体(D1R)elisa分析检测试剂盒
甲状腺受体相互作用13/瘤16型E1结合蛋白抗体 Anti-TRIP13/16E1BP
TSHELISAKit
生长抑素受体4抗体 Anti-SSTR4
组织半胱-13(CASPASE-13)活性比色法定量检测试剂盒
可溶性载质转运蛋白22A17抗体 Anti-NGALR/Slc22A17
测分型SODCu-Zn、Mn、总 100管/48样 50管/24样
Ras样蛋白B抗体 Anti-RALB
小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)elisa检测试剂盒
ZNF434
过氧化氢检测试剂盒500T
DGCR2蛋白抗体
组蛋白乙酰基转移酶GCN5抗体
DGCR2
KAT2A/GCN5
线粒体二羧酸载体蛋白20抗体 Anti-SLC25A20
ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体
磷酸化孤儿核受体蛋白Nur77抗体 Anti-Phospho-Nur77(Ser351)
Arfaptin 2
补体C3抗体KIAA1107蛋白抗体 KIAA1107 研究领域;细胞生物 人水痘带状疱疹病毒gE蛋白抗体 VZV gE 研究领域;及病毒 骨桥蛋白/分泌型磷蛋白1抗体 Osteopontin 研究领域;神经生物学 信号转导 周期素D相互作用蛋白1抗体 DMTF1 研究领域;细胞生物 细胞周期蛋白 转录调节因子 表观遗传学