一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006359 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006359 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006359 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Caspase-10
中文名称:半胱胺酸蛋白酶-10抗体
别 名;ALPS 2; ALPS2; Apoptosis related cysteine peptidase; Apoptotic protease Mch 4; CASP 10; CASP10; CASP10 protein; Caspase 10 apoptosis related cysteine peptidase; Caspase 10 apoptosis related cysteine protease; Caspase10; FADD Like Ice 2; Fas Associated Death Domain Protein; FAS associated death domain protein interleukin 1B converting enzyme 2; FLICE 2; FLICE2; ICE Like Apoptotic Protease 4; Interleukin 1B Converting Enzyme 2; MCH 4; MCH4.
研究领域;细胞生物 细胞凋亡
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human,
产品应用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=0.2ug/test IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;59kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human Caspase-10 subunit p12: 431-521/521
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Caspases are a family of intracellular proteases that mediate cell death and are the principal effectors of apoptosis. Caspase 10 (Mch4, ICE-LAP4, FLICE2) plays an important role in apoptosis induced by a variety of inducers such as TNF alpha and Anti-Fas antibody. It is a large prodomain caspase classified together with caspases 2, 8, and 9 as a signaling caspase. Four isoforms of caspase 10 (caspase 10a, 10b, 10c, and 10d) having the same prodomain but different mature large and small subdomain, have been described. Caspase 10 contains two death domains (DED) involved in linking to the death effector domain of the adapter protein FADD and recruiting the complex to TNFR1 and Fas. The inactive procaspase 10 is variably expressed in many tissues and cell lines as a cytosolic protein. The mature form of caspase 10 comprises two subunits, p23/p17 (splice isoforms) and p12. Interestingly, a caspase 9- dependent processing of caspase 10 by caspase 6 in cell-free extracts has recently been suggested. Caspase 10 can cleave and activate caspases 3, 4, 6, 7, 8, and 9. This is followed by cleavage of numerous key proteins, including the nuclear protein PARP.
Involved in the activation cascade of caspases responsible for apoptosis execution. Recruited to both Fas- and TNFR-1 receptors in a FADD dependent manner. May participate in the granzyme B apoptotic pathways. Cleaves and activates caspase-3, -4, -6, -7, -8, and -9. Hydrolyzes the small- molecule substrates, Tyr-Val-Ala-Asp-|-AMC and Asp-Glu-Val-Asp-|-AMC.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
羊环磷酸鸟苷(cGMP)elisa分析检测试剂盒
半胱天冬酶-3酶原抗体 Anti-pro-caspase-3
cGMP ELISA Kit
突触结合蛋白10抗体 Anti-Synaptotagmin X
人包虫抗体IgG elisa分析检测试剂盒
Mouse Anti-Rabbit IgM / FITC
HumanechinococcusantibodyIgGELISAKit
SFXN5蛋白抗体
丙型肝炎病毒NS5A反式蛋白13抗体
FITC标记的小鼠抗兔IgM
石蜡切片组织线粒体复合物II蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
SFXN5
小鼠金属硫蛋白1(MT-1)elisa分析检测试剂盒
人c-sis elisa分析检测试剂盒
亮氨酸含量测试盒
小鼠凝血因子Ⅳ(FⅣ)elisa分析检测试剂盒
牛5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)elisa检测试剂盒免费代测
FⅣELISAKit
NOLC1
Humanc-sisELISAKit
9号染色体开放阅读框152抗体
大鼠β防御素2(DEFB2)elisa分析检测试剂盒
C9orf152
DEFB2 ELISA kit
肿瘤坏死因子受体超家族成员27抗体 Anti-EDA2R
人核因子κB(NF-κB)elisa分析检测试剂盒
磷酸化蛋白酶活化受体4抗体 Anti-Phospho-PAR4 (Thr163)
HumanNF-κBELISAKit
半胱胺酸蛋白酶-10抗体神经肽Y受体4抗体 NPY4R 研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 G蛋白偶联受体 G蛋白信号 O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗体 O-GlcNAc transferase 研究领域;神经生物学 信号转导 转录调节因子 Alzheimer's 组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶2C抗体 KMT2C 研究领域; 表观遗传学 环指蛋白89 RNF89 研究领域;细胞生物