一抗操作步骤：
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭：这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合，从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点，以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉，缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1～2小时，特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜，以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育：在一抗孵育之前，需要参考一抗的说明书，按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后，立即加入稀释好的一抗，室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1～2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳，可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗，加入Western洗涤液，在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟，共洗涤3次。如果结果背景较高，可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤：洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合，洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液，其中的Tween20有助于去除非特异性的结合，减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定，建议清洗3-5次，每次5分钟。
|
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
|
BJ006455 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
|
BJ006455 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
|
BJ006455 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性：
英文名称：caspase-8 subunit p18
中文名称：半胱氨酸蛋白酶8抗体
别 名；Caspase-8 subunit p18; ALPS2B; Amyotrophic lateral sclerosis 2 chromosomal region candidate gene 12 protein; Apoptosis related cysteine peptidase; Apoptotic cysteine protease; Apoptotic protease Mch 5; Apoptotic protease Mch-5; Apoptotic protease Mch5; CAP 4; CAP4; CASP 8; CASP-8; CASP8; CASP8_HUMAN; Caspase 8; Caspase 8 apoptosis related cysteine peptidase; Caspase-8 subunit p18; Caspase8; CED 3; FADD homologous ICE/CED 3 like protease; FADD Homologous ICE/CED3 Like Protease; FADD Like ICE; FADD-homologous ICE/CED-3-like protease; FADD-like ICE; FLICE; FLJ17672; ICE like apoptotic protease 5; ICE-like apoptotic protease 5; MACH alpha 1/2/3 protein; MACH; MACH beta 1/2/3/4 protein; MCH 5; MCH5; MGC78473; MORT1 associated CED 3 homolog; MORT1 associated CED3 homolog; MORT1-associated CED-3 homolog; OTTHUMP00000163717; OTTHUMP00000163720; OTTHUMP00000163724; OTTHUMP00000163725; OTTHUMP00000165062; OTTHUMP00000165063; OTTHUMP00000165064; OTTHUMP00000206552; OTTHUMP00000206582
研究领域；细胞生物 神经生物学 细胞凋亡
抗体来源；Rabbit
克隆类型；Polyclonal
交叉反应； Human, Rat, (predicted: Mouse, Dog, Pig, Cow, Horse, )
产品应用；WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1μg /Test IF=1:50-200 （石蜡切片需做抗原修复）
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量；18/55kDa
细胞定位；细胞浆
性 状；Liquid
浓 度；1mg/ml
免 疫 原；KLH conjugated synthetic peptide derived from human caspase-8 subunit p18: 188-280/479
亚 型；IgG
纯化方法；affinity purified by Protein A
缓 冲 液；0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项；This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍：
Initiator caspases, which include caspase-8, activate effector caspases by cleaving inactive forms of effector caspases. In the activation cascade responsible for apoptosis induced by TNFRSF1A and mediated by TNFRSF6/FAS, caspase-8 is the most upstream protease. Caspase-8 binds to adaptor molecule FADD, forming an aggregate referred to as death-inducing signaling complex (DISC), which activates caspase-8. The actived protein is released from the complex and further activates downstream apoptotic proteases. Caspase-8, which is a heterodimer consisting of two subunits (p18 and p10), is widely expressed, but is detected at highest levels in peripheral blood leukocytes (PBLs), thymus, liver and spleen. Defects in CASP8, the gene encoding for caspase-8, may cause CASP8D (caspase-8 deficiency disorder), which is characterized by splenomegaly and CD95-induced apoptosis of PBLs, and may lead to immunodeficiency due to defects in T lymphocyte, NK cell and B lymphocyte activation.
Heterotetramer that consists of two anti-parallel arranged heterodimers, each one formed by a 18 kDa (p18) and a 10 kDa (p10) subunit. Interacts with FADD, CFLAR and PEA15. Isoform 9 interacts at the endoplasmic reticulum with a complex containing BCAP31, BAP29, BCL2 and/or BCL2L1. Interacts with TNFAIP8L2.
抗体注意事项：
确定抗体的名字和特性：注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息，这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型：了解你的实验类型（如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS），因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型，并不意味着该抗体不适用于该实验，只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属：确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等，因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质：了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体，特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时，这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择：单克隆抗体特异性强但亲和力相对小，而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性：原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体，避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择：封闭液的选择应根据抗体说明书进行，常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点，降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项：使用干净的孵育盒子，避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白，可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品：
鱼巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)elisa分析检测试剂盒
骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)人 Anti-OPN/BSP
MIF ELISA kit
电压门控钠通道5α抗体 Anti-Nav1.5/SCN5A
人补体片段3b受体(C3bR)elisa分析检测试剂盒
Rabbit Anti-Rat IgG H&L / PE-Cy7
HumanC3bRELISAKit
SAP30样蛋白抗体
活化T细胞核因子胞浆相互作用蛋白2抗体
PE-Cy7标记的兔抗大鼠IgG H&L
小鼠多胺氧化酶(PAOX)elisa检测试剂盒
SAP30L
人FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)elisa检测试剂盒
人G蛋白偶合受体44(GPR44/CRTH2/DL1R)elisa分析检测试剂盒
10倍PCB浓缩缓冲溶液
小鼠热休克蛋白70(HSP-70)elisa分析检测试剂盒
大鼠Slit源物3(Slit3)elisa检测试剂盒
Hsp-70ELISAKit
NFATC2IP
HumanGPR44ELISAkit
7号染色体开放阅读框34抗体
大鼠白介素2可溶性受体β链(sIL-2Rβ)elisa分析检测试剂盒
C7orf34
sIL-2Rβ ELISA kit
甲状腺转录因子-2抗体 Anti-TTF-2/FOXE1
人肌养蛋白(dystrophin)elisa分析检测试剂盒
Patched/PTCH抗体 Anti-Patched/PTCH
HumandystrophinELISAKit
半胱氨酸蛋白酶8抗体丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体 MAPKAP Kinase 2 研究领域； 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶 Rap1A抗体 RAP1A 研究领域；细胞生物 信号转导 G蛋白信号 5-脂氧合酶抗体 ALOX5 研究领域； 转录调节因子 激酶和磷酸酶 合成与降解 碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体 FGF2 研究领域； 心血管 细胞生物 生长因子和 内皮细胞