一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ010023 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ010023 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ010023 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:IL20
中文名称:白细胞介素-20抗体
别 名;Interleukin-20; four alpha helix cytokine; IL10D; Interleukin 20; Interleukin-20; ZCYTO10; IL20_MOUSE; Cytokine Zcyto10; IL-20; IL20_HUMAN; MGC96907; UNQ852/PRO1801.
糖蛋白
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Rat, (predicted: Human, Mouse, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;17kDa
细胞定位;分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse IL-20: 51-150/176
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
IL20 is a cytokine structurally related to interleukin 10 (IL10). This cytokine has been shown to transduce its signal through signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3) in keratinocytes. A specific receptor for this cytokine is expressed in skin and upregulated dramatically in psoriatic skin, suggesting a role for this protein in epidermal function and psoriasis.
Cytokine that may be involved in epidermal function and psoriasis. Acts through STAT3
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
鹿黄嘌呤氧化酶(XOD)elisa分析检测试剂盒
神经肽Y受体2抗体 Anti-NPY2R
XOD ELISA Kit
磷酸化原基因蛋白18抗体 Anti-Phospho-Stathmin(Ser38)
人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体(PR3-ANCA)elisa分析检测试剂盒
Rabbit Anti-Monkey IgM / HRP
PR3-ANCAELISAKit
神经丛蛋白A2抗体
粘脂蛋白1抗体
辣根过氧化物酶标记的兔抗猴IgM
体液WNV(WEST NILE)病毒定量PCR扩增检测试剂盒
Plexin A2
冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(过氧亚硝基阴离子)
人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)elisa分析检测试剂盒
大鼠三磷酸肌醇(IP3)elisa检测试剂盒
猪5羟色胺(5-HT)elisa分析检测试剂盒
豚鼠钙调素(CAM)elisa检测试剂盒
5HTELISAKit
mucolipin 1
HumanAACTELISAKit
2号染色体开放阅读框18抗体
大鼠儿茶酚胺(CA)elisa分析检测试剂盒
C2orf18
CA ELISA Kit
肿瘤坏死因子-α抗体 Anti-TNF-alpha
山羊催产素(OT)elisa分析检测试剂盒
环指蛋白6抗体 Anti-RNF6
OTELISAkit
白细胞介素-20抗体锌金属蛋白酶STE24源蛋白抗体 FACE1/ZMPSTE24 研究领域;细胞生物 发育生物学 转录调节因子 锌指蛋白 表观遗传学 补体因子I轻链抗体 Factor I light chain 研究领域;心血管 学 EFR3B蛋白抗体 EFR3B 研究领域;细胞生物 磷酸化胰岛素受体底物2抗体 phospho-IRS-2(Ser731) 产品类型磷酸化抗体