一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ009335 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ009335 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ009335 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:HEXDC
中文名称:氨基己糖苷酶D抗体
别 名;Beta hexosaminidase D; Beta N acetylhexosaminidase; FLJ23825; Hexosaminidase (glycosyl hydrolase family 20 catalytic domain) containing; hexosaminidase (glycosyl hydrolase family 20, catalytic domain; Hexosaminidase D; Hexosaminidase domain containing protein; N acetyl beta galactosaminidase; HEXDC_HUMAN.
研究领域; 细胞生物
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Dog, Horse, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;54 kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human HEXDC: 1-100/486
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
HEXDC, also known as hexosaminidase D, beta-hexosaminidase D, N-acetyl-beta-galactosaminidase, hexosaminidase domain-containing protein or beta-N-acetylhexosaminidase, is a 486 amino acid cytoplasmic and nuclear protein that has hexosaminidase activity and belongs to the glycosyl hydrolase 20 family. Existing as two alternatively spliced isoforms, HEXDC catalyzes the hydrolysis of non-reducing N-acetyl-D-hexosamine residues near the termini of N-acetyl-beta-D-hexosaminides. The gene encoding HEXDC maps to human chromosome 17, which comprises over 2.5% of the human genome and encodes over 1,200 genes. Two key tumor suppressor genes are associated with chromosome 17, namely, p53 and BRCA1. Defects in p53 is associated with malignant cell growth and Li-Fraumeni syndrome. BRCA1 is directly involved in DNA repair and is recognized as a genetic determinant of early onset breast cancer and predisposition to cancers of the ovary, colon, prostate gland and fallopian tubes.
Has hexosaminidase activity.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
细胞信号转导分子Smad-1抗体 SMAD1
染色质组装因子1P55抗体 CAF1p55/VPRBP
限制过度增殖相关蛋白EML4抗体 EML4
溶质载体家族蛋白30成员A9抗体 SLC30A9
α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体 AMACR
大鼠胰岛素受体(ISR)elisa检测试剂盒
δ样蛋白4抗体 DLL4
鱼肝油维生素A含量荧光定量检测试剂盒
中胚层诱导早期反应蛋白2抗体 MIER2
细胞VEGF蛋白表达比色法定量检测试剂盒
ATP依赖解旋酶ERCC6抗体 CSB
小鼠Slit源物3(Slit3)elisa检测试剂盒
链霉素抗体 streptomycin
人apelin 13(AP13)elisa分析检测试剂盒
辣椒素受体抗体 TRPV1
小鼠腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)elisa分析检测试剂盒
B细胞链接激活蛋白抗体 NTAL
大鼠高香草酸(HVA)elisa检测试剂盒
肿瘤抑制基因LPP2抗体 VANGL1
细胞基质金属9(MMP9)原位明胶酶谱法(in situ ?zymography)荧光染色试剂盒
干扰素α2b抗体 Interferon alpha 2b
α-酮戊二酸含量测试盒
孤儿核受体抗体 RORC
小鼠肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)elisa分析检测试剂盒
KMT5A单克隆抗体 KMT5A
鸡分泌型球蛋白A(SIgA)elisa分析检测试剂盒
MAP7D3蛋白抗体 MAP7D3
组织锂(lithium)化学比色法定量检测试剂盒
氨基己糖苷酶D抗体PRKR相互作用蛋白1抗体 PRKRIP1 研究领域;细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶 结合蛋白 表观遗传学 死亡效应结构域蛋白2抗体 DEDD2 研究领域;细胞生物 细胞凋亡 钾/钠超极化激活环核苷酸门控通道蛋白3抗体 HCN3 研究领域;心血管 神经生物学 信号转导 通道蛋白 6号染色体开放阅读框25抗体 C6orf25 研究领域;细胞生物