一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004804 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004804 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004804 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:BACE1
中文名称:β分泌酶抗体
别 名;APP beta secretase; Asp 2; ASP2; Aspartyl protease 2; BACE 1; BACE; Beta secretase 1; Beta secretase; Beta site amyloid beta A4 precursor protein cleaving enzyme; Beta site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1; Beta site amyloid precursor protein cleaving enzyme; Beta site APP cleaving enzyme 1; Beta site APP cleaving enzyme; FLJ90568; HSPC104; KIAA1149; Memapsin-2; Memapsin 2; Memapsin2; Membrane associated aspartic protease 2; Transmembrane aspartic proteinase Asp2; BACE1_HUMAN; Beta-secretase 1; Beta-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1; Beta-site APP cleaving enzyme 1; Membrane-associated aspartic protease 2.
研究领域;神经生物学 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶 合成与降解
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Chicken, Dog, Pig, Rabbit, Guinea Pig, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;51kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human BACE1: 401-501/501
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Cerebral deposition of amyloid beta peptide is an early and critical feature of Alzheimer's disease. Amyloid beta peptide is generated by proteolytic cleavage of amyloid precursor protein(APP) by two proteases, one of which is the protein encoded by this gene. The encoded protein, a member of the peptidase A1 protein family, is a type I integral membrane glycoprotein and aspartic protease that is found mainly in the Golgi. Multiple transcript variants encoding different isoforms have been described for this gene. [provided by RefSeq].
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
重组激活基因2蛋白抗体 RAG2
素Mundticin KS多肽前体抗体 Mundticin KS precursor
转化生长因子β1结合蛋白抗体 CD109
锌指蛋白136抗体 ZNF136
谷氨酸脱羧酶-65抗体 GAD65
吲哚乙酸氧化酶活性检测试剂盒
果蝇inaD蛋白抗体 inaD
人叠氮胸苷(AZT)elisa分析检测试剂盒
CD68重组兔单克隆抗体 CD68
大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)elisa检测试剂盒
MDM1蛋白抗体 MDM1
组织HCV(HEPATITIS VIRUS C)病毒定量PCR扩增检测试剂盒
乳腺癌NY BR 85抗原抗体 Shugoshin
冰冻切片组织CASPASE-5蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
溶血磷脂酰基转移酶5抗体 AGPAT5
ATP含量测试盒
NADH氧化还原酶辅酶4抗体 NDUFA4
小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)elisa检测试剂盒
C末端结合蛋白2抗体 CTBP2
谷胱甘肽还原酶(GR)测试盒
磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体 phospho-DAXX (Ser517)
兔骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa检测试剂盒
磷酸化肠道内富含的Kruppel样因子5抗体 phospho-KLF5 (Ser311)
血液牛病毒性腹泻病毒(Bovine Viral Diarrhoea Virus;BVDV)
白介素3抗体 IL-3
溶酶体膜完整性(integrity)组织D释放法检测试剂盒
胞浆蛋白PACSIN3抗体 PACSIN3
大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa检测试剂盒
β分泌酶抗体钼辅因子合成蛋白3抗体 MOCS3 研究领域;细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶 新陈代谢 FUT5抗体 FUT5 抗体来源;Rabbit 乙酰转移酶13抗体 NAT13 研究领域;细胞生物 分化相关基因NDRG1抗体 NDRG1 研究领域;细胞生物 神经生物学 转运蛋白