一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008942 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008942 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008942 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Beta galactosidase
中文名称:β半乳糖苷酶抗体
别 名;BGAL_HUMAN; Beta-galactosidase; GLB1; EC:3.2.1.23; Acid beta-galactosidase (Lactase); Elastin receptor 1; ELNR1; galactosidase beta 1; EBP; ELNR1; MPS4B; β-Galactosidase; β Galactosidase.
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Dog, )
产品应用;IHC-P=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;71kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human Beta galactosidase: 221-290/677
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a member of the glycosyl hydrolase 35 family of proteins. Alternative splicing results in multiple transcript variants, at least one of which encodes a preproprotein that is proteolytically processed to generate the mature lysosomal enzyme. This enzyme catalyzes the hydrolysis of a terminal beta-linked galactose residue from ganglioside substrates and other glycoconjugates. Mutations in this gene may result in GM1-gangliosidosis and Morquio B syndrome. [provided by RefSeq, Nov 2015]
Cleaves beta-linked terminal galactosyl residues from gangliosides, glycoproteins, and glycosaminoglycans.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
磷酸化细胞骨架肌动蛋白样蛋白3抗体
活性氧簇ROS抗体 Anti-ROS/c ros
phospho-ARP3 (Ser418)
分选连接蛋白2抗体 Anti-SNX2
热休克因子结合蛋白1样蛋白1抗体
PⅠNP ELISA Kit
HSBP1L1
人钙/钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK 2)elisa分析检测试剂盒
Cy5.5标记的兔抗长爪沙鼠IgG H&L
大鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)elisa分析检测试剂盒
组织型纤溶酶原激活剂抗体 Anti-TPA/PLAT
HumanCAMK2ELISAKit
SAMD14抗体 Anti-SAMD14
人白介素4受体(IL4R/CD124)elisa检测试剂盒
小鼠抗p21激活激酶4抗体 Anti-PAK4
小鼠凝血因子XIII B(F13B)elisa检测试剂盒
突触富含脯氨酸膜蛋白7抗体 Anti-PRR7
大鼠骨形成蛋白(BMPs)elisa检测试剂盒
Rabbit Anti-MG IgG H&L / Cy5.5
体液尿激酶(UROKINASE)活性比色法定量检测试剂盒
磷酸化细丝蛋白A抗体
甲基样蛋白16抗体
phospho-Filamin A (Ser1083)
METT10D
ZCWCC1抗体 Anti-ZCWCC1
视神经细胞相关蛋白/早老素结合蛋白抗体
细胞分裂周期相关蛋白1抗体 Anti-CDCA1/Nuf2
DOCK3
β半乳糖苷酶抗体神经肽Y受体5抗体 NPY5R 研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 通道蛋白 细胞膜受体 G蛋白偶联受体 G蛋白信号 p105 CAF1蛋白抗体 p105 CAF1 研究领域;细胞生物 表观遗传学 组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶3A抗体 KMT3A 研究领域;细胞生物 神经生物学 转录调节因子 表观遗传学 环指蛋白8抗体 RNF8 研究领域;细胞生物 信号转导 转录调节因子 表观遗传学