一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008660 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008660 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008660 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:GANAB
中文名称:α葡萄糖苷酶2抗体
别 名;Glucosidase IIα; Alpha glucosidase II alpha subunit; Alpha-glucosidase 2; G2AN; GANAB; GANAB_HUMAN; Glu II; Glucosidase alpha neutral AB; Glucosidase II alpha; Glucosidase II subunit alpha; GluII; KIAA0088; Neutral alpha glucosidase AB; Neutral alpha glucosidase AB precursor; Neutral alpha-glucosidase AB.
研究领域; 细胞生物 神经生物学 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, Rat, (predicted: Human, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;104kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human GANAB/alpha Glucosidase II: 428-540/944
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Trimming of glucoses from N-linked core glycans on newly synthesized glycoproteins occurs sequentially through the action of Glucosidases I and II in the endoplasmic reticulum (ER). Glucosidase II is an ER-localized enzyme that contains a and b subunits (Glucosidase IIa and Glucosidase IIb) which form a defined heterodimeric complex. Glucosidase IIa is the catalyitc core of the enzyme and can function independently of the b subunit. The sequence of Glucosidase IIb encodes protein rich in glutamic and aspartic acid with a putative ER retention signal (HDEL) at the C-terminus. The phosphorylated form of Glucosidase IIb is localized in the plasma membrane and is highly expressed in FGF-stimulated fibroblasts and epidermal carcinoma cells. Glucosidase IIb was first purified from a human carcinoma cell line as a potential substrate for protein kinase C. Through the HDEL signal at the C-terminus, Glucosidase IIb retains the complete complex in the ER.
Cleaves sequentially the 2 innermost alpha-1,3-linked glucose residues from the Glc(2)Man(9)GlcNAc(2) oligosaccharide precursor of immature glycoproteins.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
OSGIN2蛋白抗体
环指蛋白70抗体 Anti-RNF70
OSGIN2
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗体 Anti-phospho-SAPK3 (Thr183+Tyr185)
HEAT重复内含蛋白7A蛋白抗体
Rat N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 2 (NR2) ELISA Kit
HEATR7A
人骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析检测试剂盒
单纯疱疹病毒HSV1 GE包膜蛋白抗体
大鼠N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体亚单位NR2 elisa分析检测试剂盒
微管蛋白γ/Tubulin γ抗体 Anti-gamma tubulin (Centrosome Marker )
OT/BGPELISAkit
丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白1抗体 Anti-SRRM1
组织SPHK2激酶活性比色法定量检测试剂盒(510)
磷酸酯酶3蛋白抗体 Anti-PRL3/PRL-R
大鼠成纤维细胞生长因子13(FGF-13)elisa检测试剂盒
肝再生磷酸酯酶2抗体 Anti-PRL2/PTP4A2
小鼠胰α淀粉酶(AMY2A)elisa检测试剂盒
HSV1 gE Envelope Protein
人半乳糖凝集素-7(Gal-7)elisa分析检测试剂盒
嗅觉受体6B1抗体
潜在型TGF-β结合蛋白2抗体
OR6B1
LTBP2/C14orf141
锌指蛋白503抗体 Anti-ZNF503/NOLZ1
细胞色素P450 4V2抗体
螺旋环螺旋蛋白1+2抗体 Anti-NHLH1 + NHLH2
CYP4V2
α葡萄糖苷酶2抗体味觉受体蛋白家族10亚基5抗体 OR10A5 研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞膜受体 G蛋白偶联受体 G蛋白信号 TUB蛋白抗体 TUB 1 研究领域;神经生物学 转录调节因子 表观遗传学 APC标记小鼠CD122单克隆抗体 mouse CD122/APC 抗体来源;Rat 酪蛋白激酶1γ2重组兔单克隆抗体 CSNK1G2 抗体来源;Rabbit