一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004173 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004173 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004173 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:A1BG
中文名称:α1B糖蛋白抗体
别 名;A1B; A1BG_HUMAN; ABG; Alpha 1 B glycoprotein; Alpha-1-B glycoprotein; Alpha-1B-glycoprotein; alpha 1B Glycoprotein; DKFZp686F0970; GAB; HYST2477.
研究领域;细胞生物 糖蛋白
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;52kDa
细胞定位;分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human A1BG: 301-400/495
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The protein encoded by this gene is a plasma glycoprotein of unknown function. The protein shows sequence similarity to the variable regions of some immunoglobulin supergene family member proteins. [provided by RefSeq, Jul 2008].
Interacts with CRISP3.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
伴肌动蛋白抗体
环指蛋白39抗体 Anti-RNF39
Nebulin
转录因子相关蛋白TRRAP抗体 Anti-TRRAP
Gastrokine 2蛋白抗体
LIF ELISA Kit
Gastrokine 2
人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)elisa分析检测试剂盒
磷酸化GATA结合蛋白3抗体
大鼠白血病抑制因子(LIF)elisa分析检测试剂盒
脱中胚蛋白抗体 Anti-TBR2/Eomes
HumanTIMP-2ELISAKit
Snail蛋白抗体 Anti-Snail/SNAI 1
人Ephrin-B2(EFNB2)elisa检测试剂盒
八聚体结合转录因子6抗体 Anti-OCT6
小鼠淀粉样前体蛋白(APP)elisa检测试剂盒
磷酸化p21激活激酶3抗体 Anti-phospho-PAK3(Ser139)
大鼠Slit源物1(Slit1)elisa检测试剂盒
phospho-GATA3 (Ser115)
MAYER苏木素复染试剂盒
神经外营养蛋白2抗体
急性细胞性白血病1抗体
NXPH2
KMT2A
腺苷酸环化酶激活肽受体-II/血管活性肠肽受体-II抗体 Anti-VIP receptor 2/VPAC2
趋化素样因子超家族成员5抗体
肾小球细胞粘附分子受体抗体 Anti-Nephrin
CKLFH5
α1B糖蛋白抗体嗅觉受体5D14抗体 OR5D14 研究领域;细胞生物 信号转导 细胞膜受体 G蛋白偶联受体 G蛋白信号 细胞膜蛋白 电压门控钾通道Kv1.8抗体 Kv1.8 研究领域; 心血管 细胞生物 信号转导 通道蛋白 跨膜蛋白 细胞膜蛋白 FLJ45825蛋白抗体 FLJ45825 研究领域;细胞生物 脑红蛋白/神经血红蛋白/神经球蛋白抗体 NGB 研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞凋亡