一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ015057 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ015057 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ015057 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Smad4
中文名称:Smad4抗体
别 名;Mothers against decapentaplegic homolog 4;
(Small) Mothers Against Decapentaplegic; Deleted in Pancreatic Carcinoma;
Deleted in pancreatic carcinoma locus 4; Deletion target in pancreatic
carcinoma 4; DPC 4; DPC4; hSMAD4; JIP; MAD homolog 4; MAD mothers against
decapentaplegic Drosophila homolog 4; MAD mothers against decapentaplegic
homolog 4; MADH 4; MADH4; Med; Medea; Mothers against decapentaplegic homolog
4; Mothers against DPP homolog 4; OTTHUMP00000163548; Smad 4; SMAD family
member 4; SMAD mothers against DPP homolog 4.
研究领域; 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 生长因子和
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat,
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;60kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Smad4: 31-120/545
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Smad 4 is a member of the Mothers Against Dpp (MAD)-related family of proteins. So far, eight Smads have been identified and can be divided in 3 subgroups based on their structure and functions; pathway-restricted, common mediator and inhibitory Smad. Smad 4 is the common Smad (co-Smad). Previously identified as the tumor suppressor DPC4 (deleted in pancreatic carcinoma, locus 4), Smad 4 is functionally distinct among the Smad family, and is required for the assembly and transcriptional activation of diverse, Smad-DNA complexes. In contrast to the R-Smads, Smad 4 is not regulated by phosphorylation, but acts as a common mediator of TGF-Beta, activin, and bone morphogenetic protein signaling responses. Smad 4 is frequently inactivated in pancreatic, biliary and colorectal tumors.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
KDELC2蛋白抗体
前列环素受体抗体 Anti-Prostaglandin I2 Receptor
KDELC2
泛素硫酯酶L1+3抗体 Anti-UCHL1+3
中心体蛋白89抗体
Goat Anti-Guinea
Pig IgG H&L / Gold
CEP89
β葡萄糖苷酶3抗体
RPS27A抗体
胶体金标记的羊抗豚鼠IgG H&L
人蛋白激酶C(PKC)elisa分析检测试剂盒
GBA3
大鼠趋化因子9(CXCL9)elisa检测试剂盒
猫脑源性神经营养因子(BDNF)elisa分析检测试剂盒
辅酶Q10含量试剂盒
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)elisa分析检测试剂盒
细胞HSV2(HERPES
SIMPLX2)病毒定量PCR扩增检测试剂盒
PF/PFPELISAKit
RPS27A
BDNF ELISA kit
KRBA2蛋白抗体
植物维生素K1(VK1)elisa分析检测试剂盒
KRBA2
VK1 ELISA Kit
S100钙结合蛋白A11抗体 Anti-S100A11
人催乳素抑制(PIH)elisa分析检测试剂盒
对氧磷酶3抗体 Anti-PON3
HumanPIHELISAKit
Smad4抗体PE标记人CD37单克隆抗体 human CD37/PE 抗体来源;Mouse 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SBK2抗体 SBK2 研究领域;细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶 即早反应蛋白3相互作用蛋白1抗体 IER3IP1 研究领域;细胞生物 信号转导 细胞周期蛋白 转运蛋白 3号染色体开放阅读框30抗体 C3orf30 研究领域; 心血管 细胞生物 发育生物学 表观遗传学