一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ013008 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ013008 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ013008 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:RAB40B
中文名称:RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗体
别 名;SEC4L; GTP binding protein homologous to
Saccharomyces cerevisiae SEC4; RAB40B member RAS oncogene family; RAR; Rar
protein; Ras related protein Rab 40B; RP23 293H17.2; SOCS box containing
protein RAR; FLJ42385; RB40B_HUMAN.
研究领域; 细胞生物 信号转导 G蛋白信号
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;IHC-P=1:100-500
IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;31kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human RAB40B: 121-220/278
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
RAB40B is similar to
a yeast protein which suggests a role of the gene product in regulating
secretory vesicles. It may be a substrate recognition component of a SCF like
ECS (Elongin Cullin SOCS box protein) E3 ubiquitin ligase complex which
mediates the ubiquitination and subsequent proteasomal degradation of target
proteins.
May be a substrate-recognition component of a SCF-like ECS (Elongin-Cullin-SOCS-box protein) E3 ubiquitin ligase complex which mediates the ubiquitination and subsequent proteasomal degradation of target proteins (By similarity).
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
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双特异性磷酸酶抗体16抗体 DUSP16
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碳酸酐酶6抗体 CA6
胆碱磷酸酯酶2抗体 Phospholipase D2
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蛋白酶活化受体4抗体 PAR4
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土壤锂(lithium)酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒
磷酸酯酶-2Ac抗体 PPP4C
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小量微藻菌基因组DNA氯化铯萃取试剂盒(高多糖/酚)
FBXO22蛋白抗体 FBXO22
兔CD8分子(CD8)elisa检测试剂盒
2号染色体开放阅读框18抗体 C2orf18
大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1(UGT1)elisa检测试剂盒
肌动蛋白结合蛋白CFL抗体 Cofilin
人解脲脲原体抗体(UU-Ab)elisa分析检测试剂盒
鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(HVT)抗体 Marek's disease turkey herpesvirus
无脊椎动物和昆虫细胞基质金属(MMP)总活性比色法定量检测试剂盒
PE标记小鼠CD38单克隆抗体 mouse CD38/PE
小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)elisa检测试剂盒
Rabbit
Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys64) antibody
大鼠孤腓肽(OFQ/N)elisa检测试剂盒
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