一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012576 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012576 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012576 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:PIWIL1
中文名称:piwi样1蛋白抗体
别 名;PIWL1_HUMAN; Piwi-like protein 1.
研究领域; 细胞生物 信号转导 转录调节因子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, (predicted: Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse,
Rabbit, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1μg/Test ICC=1:100-500
IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;99kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human PIWIL1: 421-520/861
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白1抗体 FNDC1
液泡蛋白分选受体SORCS抗体 SORCS1
AF680标记的甲胎蛋白抗体 AFP, Alexa Fluor 680 conjugated
诱导协刺激分子CD278重组兔单克隆抗体 ICOS
减数分裂阻滞蛋白1抗体 LIMKAIN B1
大鼠花生四烯酸(AA)elisa检测试剂盒
金属蛋白酶组织抑制因子-4抗体 TIMP-4
组织ERK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
G蛋白β5/Gβ 5 抗体 GNB5
Diff Quik染色液三试剂 20ml×4 100ml×4
SARS冠状病毒2 Spike S1单克隆抗体 SARS-CoV-2
(2019-nCoV) Spike S1
人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa分析检测试剂盒
突触结合蛋白2抗体 EF-CBP2
大鼠中期因子(MK)elisa检测试剂盒
铁/锌紫色酸性磷酸酶蛋白抗体 PAPL
小鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa检测试剂盒
SMYD5蛋白抗体 SMYD5
仓鼠谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)elisa检测试剂盒免费代测
G蛋白偶联受体GPR37样蛋白1抗体 GPR37L1
石蜡切片组织JNK/SAPK蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
脑型肌酸激酶B型抗体 Creatine Kinase B
细胞色素P450亚酶1A2(PHENACETIN)活性高效液相色谱法(HPLC)定量检测试剂盒
尿皮质素UCN3抗体 Urocortin 3
豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)elisa检测试剂盒
泛素激活酶E1抗体 E1 Ubiquitin Activating Enzyme
大鼠色氨酸5羟化酶2(TPH2)elisa检测试剂盒
肺表面活性蛋白B抗体 SP-B/Surfactant Protein B
体液氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(过氧亚硝基阴离子)
piwi样1蛋白抗体异柠檬酸脱氢酶gamma亚基抗体 IDH3G 研究领域; 细胞生物 信号转导 新陈代谢 线粒体 分泌载体膜蛋白2抗体 SCAMP2 研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞膜蛋白 HLA DPB1抗体 H2-DMb1 神经生物学 驱动蛋白结合蛋白1抗体 TRAK1 研究领域; 信号转导 细胞骨架 细胞生物标志物 线粒体