一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004303 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004303 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004303 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:APNG/MPG
中文名称:N-甲基嘌呤DNA糖基化酶
别 名;MPG; N-methylpurine-DNA glycosylase isoform a;
DNA 3 methyladenine glycosylase; 3 alkyladenine DNA glycosylase; AAG; ADPG;
Alkyladenine DNA glycosylase; anpg ; APNG; MDG; N methylpurine DNA glycosirase;
CRA36.1; MDG; Mid1; PIG11; PIG16; 3MG_HUMAN.
研究领域;细胞生物 染色质和核信号 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Pig, Cow, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;33kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human APNG/MPG: 101-200/298
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
MPG (N-methylpurine
DNA glycosylase, or 3-methyladenine (3MeA) DNA glycosylase) repairs the 3MeA
lethal lesion blocking DNA replication in Escherichia coli. Analysis of human
cDNA libraries found a cDNA that would hybridize to human genomic DNA but not
to E. coli or yeast DNA. This MPG gene has been mapped to human chromosome 16
by analysis of a panel of DNAs from mouse/human and hamster/human hybrid cell
lines.
Hydrolysis of the deoxyribose N-glycosidic bond to excise 3-methyladenine, and 7-methylguanine from the damaged DNA polymer formed by alkylation lesions.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
细胞色素c氧化酶IV亚型1抗体 COX4I1
驱动蛋白家族成员6抗体 KIF6
细胞质FMR1相关蛋白2抗体 CYFIP2
人类巨细胞病毒抗体 HHV4/CMV
X连锁脑特异性BPX蛋白抗体 NHP2L2
小鼠凝血因子Ⅺ(FⅪ)elisa检测试剂盒
β半乳糖苷酶1样蛋白3抗体 GLB1L3
人CD15分子(CD15)elisa检测试剂盒
整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体 ADAMTS7
大鼠睾酮(T)elisa检测试剂盒
APC标记人CD95单克隆抗体 human CD95/APC
体液基质金属(MMP-2)捕获检测试剂盒
酪氨酸蛋白激酶A3受体抗体 Ephrin A3
动物脑组织细胞分离培养试剂盒
跨膜γ羧基酸蛋白4抗体 PRRG4
转基因玉米MON863品系基因定量检测试剂盒
A型禽流感病毒H7N9 M1蛋白抗体 H7N9 HA
小鼠α2抗纤溶酶(α2-AP)elisa分析检测试剂盒
中性胆固醇酯水解酶1抗体 AADACL1
大鼠抑制素A(INH-A)elisa检测试剂盒
甘氨酸受体β/GlyR β抗体 GLRB
人活性氧(ROS)elisa检测试剂盒
干扰素诱导T细胞趋化因子抗体 CXCL11
苯乙醇(PEA)革兰氏阳性选择琼脂平板
KDM3A蛋白抗体 KDM3A/JMJD1A
小鼠组织蛋白酶G(CTSG)elisa检测试剂盒
LCK相互作用膜蛋白抗体 LIME
大鼠葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)elisa检测试剂盒
N-甲基嘌呤DNA糖基化酶FOXD4L1蛋白抗体 FOXD4L1 研究领域;细胞生物 转录调节因子 表观遗传学 脑特定蛋白Brn3B抗体 BRN3B 研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 干细胞 表观遗传学 非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体 c-Abl 研究领域; 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶 线粒体 应激相关内质网蛋白1抗体 SERP1 研究领域;细胞生物