一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ011349 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ011349 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ011349 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:NLE1
中文名称:NLE1蛋白抗体
别 名;FLJ10458; NLE 1; Nle; Notchless gene homolog;
Notchless homolog 1 (Drosophila); Notchless homolog 1; Notchless protein
homolog 1; NLE1_HUMAN.
研究领域;细胞生物 染色质和核信号 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Pig, Cow, Horse,
Rabbit, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;53kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓
度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human NLE1: 351-450/485
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The Notch signaling
pathway is an evolutionary conserved system that is involved in intracellular
communication. Notch receptors play an important role in development and
cell-fate decisions. Notchless is a loss-of-function mutant allele that encodes
for protein NLE1 (notchless homolog 1). NLE1 is a 485 amino acid WD40-repeat
protein that binds to the cytoplasmic domain of Notch, regulating its signaling
activity in Drosophila melanogaster and in mice. Deletion of the NLE1 gene in
mice during the early stages of development results in embryonic death, while
gene deletion in the late stages of development leads to activation of a
caspase-3-dependent apoptotic pathway. In plants, NLE1 is crucial for normal
cellular growth and development. Under-expression during shoot proliferation
causes pleiotropic defects such as delayed flowering and abnormal organ
maturation. It may also play a role in 60S ribosomal subunit biogenesis in
yeast. NLE1 contains eight WD40 domains and produces one isoform due to
alternative splicing.
NLE1 (Notchless protein homolog 1) contains 8 WD repeats and may be involved in the Notch signaling pathway.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
Pacific Blue标记人CD11b单克隆抗体 human
CD11b/Pacific Blue
DIMT1L蛋白抗体 DIMT1L
PE-Cy7标记人CD71单克隆抗体 human CD71/PE-Cy7
FAM101A蛋白抗体 FAM101A
神经突触素13抗体 Syntaxin 13
鸭极低密度脂蛋白(VLDL)elisa检测试剂盒
生精细胞凋亡相关基因3抗体 TSARG3
人蛋白激酶B(PKB)elisa分析检测试剂盒
巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体 Nestin
大鼠金属硫蛋白1(MT1)elisa检测试剂盒
核小体组装蛋白1样蛋白6抗体 NAP1L6
细胞HSV1(HERPES
SIMPLX1)病毒定性检测试剂盒
自噬相关基因AMBRA1抗体 AMBRA1
冰冻切片组织PDGF-B蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
转录因子2B抗体 GTL3
BLOTTO 10核酸杂交封闭溶液
环核苷酸门控阳离子通道蛋白CNG-1β抗体 CNGB1
小鼠骨形成蛋白8B(BMP8B)elisa检测试剂盒
脆性组氨酸三联体抗体 FHIT
可可碱含量测试盒
锌指蛋白197抗体 ZNF197
糖原磷酸化酶a(GPa)试剂盒
锌指蛋白570抗体 ZNF570
通用型肠杆菌(Enterobacteriacea STX2)基因检测试剂盒
磷酸化染色质相关蛋白1-γ抗体 Phospho-HP1 gamma (Ser93)
动物硬组织高质纯化线粒体分离试剂盒
磷酸化细胞角蛋白8抗体 phospho-Cytokeratin 8 (Ser431)
大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)elisa检测试剂盒
NLE1蛋白抗体MYC诱导线粒体蛋白抗体 Mimitin 研究领域; 信号转导 细胞生物标志物 上皮粘连调控蛋白ESRP2抗体 ESRP2 研究领域;细胞生物 细胞粘附分子 细胞类型标志物 表观遗传学 核因子κB抑制蛋白β单克隆抗体 IKB beta 研究领域; 转录调节因子 自然杀伤细胞凝集素样受体3(Ly 49c)抗体 Klra3 研究领域;细胞生物 细胞膜受体 自然杀伤细胞