一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ011760 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ011760 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ011760 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:NKG2D
中文名称:NK细胞受体2D抗体
别 名;KLRK1; natural killer cell group 2D; NKG2-D isoform
b; Klrk1; Nkrp2; NKG2-D type II integral membrane protein; NKG2-D-activating NK
receptor; NK cell receptor D; Killer cell lectin-like receptor subfamily K; NK
lectin-like receptor; CD314; CD 314; CD314 antigen; D12S2489E; Killer cell
lectin like receptor subfamily K member 1; Killer cell lectin-like receptor
subfamily K member 1; KLR; Klrk1; NKG2 D activating NK receptor; NKG2 D type II
integral membrane protein; NKG2-D-activating NK receptor; NKG2D_HUMAN; NKLLR;
NKR P2; Nkrp2.
研究领域;细胞生物
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Pig, )
产品应用;WB=1:500-2000
Flow-Cyt=1ug/Test
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;25kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human NKG2D: 101-200/219 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This locus
represents naturally occurring read-through transcription between the
neighboring KLRC4 (killer cell lectin-like receptor subfamily C, member 4) and
KLRK1 (killer cell lectin-like receptor subfamily K, member 1) genes on
chromosome 12. The read-through transcript includes an alternate 5' exon and
lacks a significant portion of the KLRC4 coding sequence, including the start
codon, and it thus encodes the KLRK1 protein. [provided by RefSeq, Dec 2010]
Receptor for MICA, MICB, ULBP1, ULBP2, ULBP3 (ULBP2>ULBP1>ULBP3) and ULBP4. Plays a role as a receptor for the recognition of MHC class I HLA-E molecules by NK cells and some cytotoxic T-cells. Involved in the immune surveillance exerted by T- and B-lymphocytes.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
ras基因相关蛋白RAB5C抗体 RAB5C
FBXW5蛋白抗体 FBXW5
RRP4蛋白抗体 RRP4
FLJ25006蛋白抗体 FLJ25006
死亡相关转录因子1抗体 DATF1
组织线粒体NADH氧化酶活性定量检测试剂盒
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几丁质酶3样蛋白2抗体 Chitinase 3 like protein 2
大鼠蛋白C(PROC)elisa检测试剂盒
3号染色体开放阅读框18抗体 C3orf18
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶CYP2C19(CEC)活性
1号染色体开放阅读框83抗体 C1orf83
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钾离子通道蛋白18抗体 KCNK18
APC蛋白表达西方杂交分析试剂盒
二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗体 ARL6
小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)elisa检测试剂盒
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有机磷农药残留试剂盒
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大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)elisa检测试剂盒免费代测
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组蛋白脱乙酰化酶11(HDAC11)活性比色法定量检测试剂盒
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