一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ011452 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ011452 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ011452 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Nck beta
中文名称:NCK衔接蛋白2抗体
别 名;Cytoplasmic protein NCK2; NCK2; GRB4; Growth
factor receptor bound protein 4; NCK adaptor protein 2; Nck-2; NCK2;
NCK2_HUMAN; NCKbeta; Non-catalytic region of tyrosine kinase adaptor protein 2;
Noncatalytic region of tyrosine kinase beta; SH2/SH3 adaptor protein NCK-beta;
SH2/SH3 adaptor protein NCK-beta.
研究领域; 细胞生物 染色质和核信号 信号转导 细胞周期蛋白 细胞类型标志物 细胞骨架 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Chicken, Dog, Cow,
Horse, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;43kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human NCK2/Nck beta: 301-380/380
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a
member of the NCK family of adaptor proteins. The protein contains three SH3
domains and one SH2 domain. The protein has no known catalytic function but has
been shown to bind and recruit various proteins involved in the regulation of
receptor protein tyrosine kinases. It is through these regulatory activities
that this protein is believed to be involved in cytoskeletal reorganization.
Alternate transcriptional splice variants, encoding different isoforms, have
been characterized. [provided by RefSeq].
Adapter protein which associates with tyrosine-phosphorylated growth factor receptors or their cellular substrates. Maintains low levels of EIF2S1 phosphorylation by promoting its dephosphorylation by PP1. Plays a role in ELK1-dependent transcriptional activation in response to activated Ras signaling.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
NUDT14蛋白抗体 NUDT14
CREB结合蛋白p300抗体
Pacific Blue标记小鼠Ly-6C单克隆抗体 mouse
Ly-6C/Pacific Blue
DRIM蛋白抗体 DRIM
上游结合蛋白1抗体 Upstream Binding Protein 1
人高尔基蛋白73(GP-73)elisa分析检测试剂盒
神经细胞分化因子2抗体 Neuro D2
大鼠过敏/补体片断4a(C4a)elisa检测试剂盒
补体C2b链多肽抗体 C2b
标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒
核仁蛋白58抗体 NOP58
钾K测试盒带标准 30管/25样 96T 比浊法(手工
转录因子Gli3抗体 Gli3
小鼠β-防御素(β-DF)elisa检测试剂盒
轴突生长因子CD108抗体 CD108
IL蛋白共沉淀分析试剂盒
核转录因子SOX6抗体 SOX6
β-羟丁酸脱氢酶EC1.1.1.30
10KU/瓶
成纤维细胞生长因子23抗体 FGF23
乳糖含量测试盒
小鼠抗人CD14单克隆抗体 human CD14
大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)elisa检测试剂盒免费代测
锌指蛋白24抗体 ZNF24
DNA损伤彗星荧光检测试剂盒
磷酸化肌醇聚磷酸盐磷酸酶样蛋白1抗体 Phospho-INPPL1 (Tyr1135)
豚鼠Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)elisa分析检测试剂盒
磷酸化神经细胞正五聚体1抗体 phospho-NPTX1 (Tyr344)
咖啡糖精(saccharin)含量红外光谱法定量检测试剂盒
NCK衔接蛋白2抗体γ-5羧酸合成酶抗体 P5CS 研究领域; 细胞生物 信号转导 细胞周期蛋白依赖性激酶5激活因子1抗体 CDK5R1/p35 研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞周期蛋白 转录调节因子 激酶和磷酸酶 表观遗传学 磷酸化β 连环素蛋白重组兔单克隆抗体 Phospho-Beta Catenin (Ser675) 产品类型磷酸化抗体 重组兔单抗 CHIC2蛋白抗体 CHIC2 研究领域; 细胞生物