一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ013195 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ013195 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ013195 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:RAE1
中文名称:mRNA结合蛋白抗体
别 名;RAE-1; MIG 14; MIG14; Mnrp 41; Mnrp41; mRNA
associated protein mrnp 41; mRNA binding protein 41 kD; mRNA export protein;
MRNP 41; MRNP41; RAE 1; RAE1 (RNA export 1 S.pombe) homolog; RAE1 homolog; Rae1
protein homolog; RAE1 RNA export 1 homolog; RNA export 1; RNA export 1 homolog;
Homolog of yeast Rae1 mRNA associated protein of 41 kDa. RAE1L_HUMAN
研究领域; 细胞生物 信号转导 转录调节因子 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;41kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human RAE1: 101-200/368
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Mutations in Rae1
and Gle2(Saccharomyces cerevisae homolog) genes have been shown to result in
accumulation of poly(A)-containing mRNA in the nucleus, suggesting that the
encoded proteins are involved in RNA export. It contains four WD40 motifs, and
has been shown to localize to distinct foci in the nucleoplasm, to the nuclear
rim, and to meshwork-like structures throughout the cytoplasm. This gene is
thought to be involved in nucleocytoplasmic transport, and in directly or
indirectly attaching cytoplasmic mRNPs to the cytoskeleton. Depletion of Rae1
from extracts or cells severely inhibits mitotic spindle assembly.
Alternatively spliced transcript variants encoding the same protein have been
found for this gene.
Binds mRNA. May function in nucleocytoplasmic transport and in directly or indirectly attaching cytoplasmic mRNPs to the cytoskeleton.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
14号染色体开放阅读框106抗体 C14orf106
锌指蛋白741抗体 KLF3/ZNF741
1号染色体开放阅读框58抗体 C1orf158
嗅球蛋白3抗体 Optimedin
环指蛋白24抗体 RNF24
大鼠白介素9(IL-9)elisa检测试剂盒
肌红蛋白抗体 Myoglobin
石蜡切片神经纤维银染试剂盒
FAM166A蛋白抗体 FAM166A
小鼠热休克蛋白70(HSP-70)elisa分析检测试剂盒
PE标记人CD10单克隆抗体 human CD10/PE
人β乳糖蛋白抗体IgG elisa检测试剂盒
水通道蛋白-9抗体 AQP9
大鼠神经调节蛋白2(NRG2)elisa检测试剂盒
视黄醇结合蛋白抗体 CRABP1/Retinol binding
protein
豚鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)elisa分析检测试剂盒
PE标记小鼠Qa-2单克隆抗体 mouse Qa-2/PE
3’末端DNA探针位素([α32P]dATP)转移酶标记试剂盒
FBXO42蛋白抗体 FBXO42
细胞氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒
磷酸化有丝分裂驱动蛋白样2抗体 phospho-KIF20A (Ser528)
NADPH浓度比色法定量检测试剂盒
磷脂酶A2激活蛋白抗体 PLAA
人核转录因子κB(NFκB)elisa检测试剂盒
胆碱酯酶抑制剂8抗体 RIC8A
大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)elisa检测试剂盒
蛋白酶激活受体-2抗体 PAR-2
植物线粒体蛋白提取试剂盒50T
mRNA结合蛋白抗体庚型肝炎病毒多聚蛋白/Hepatitis G Virus抗体 HGV Polyprotein 研究领域;及病毒
坏死因子α转换酶抗体 ADAM17 研究领域; 神经生物学 信号转导 转录调节因子 三羟基基辅酶A还原酶抗体 HMGCR 研究领域; 细胞生物 信号转导 转录调节因子 NEDD4结合蛋白2样蛋白1抗体 N42L1 研究领域;细胞生物