一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ010250 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ010250 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ010250 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:KLHL20
中文名称:Kelch样蛋白20抗体
别 名;Kelch like ECT2 interacting protein; Kelch
like protein 20; Kelch like protein X; Kelch motif containing protein;
Kelch-like ECT2-interacting protein; Kelch-like protein 20; Kelch-like protein
X; KHLHX; KLEIP; KLH20_HUMAN; KLHL20; KLHLX; RP3-383J4.3.
研究领域;心血管 细胞生物 信号转导 血管内皮细胞 细胞外基质
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Rat, (predicted: Human, Mouse, Chicken, Cow,
Rabbit, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500
IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;68kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human KLHL20: 13-100/609
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Substrate-specific
adapter of a BCR (BTB-CUL3-RBX1) E3 ubiquitin-protein ligase complex involved
in interferon response. The BCR(KLHL20) E3 ubiquitin ligase complex mediates
the ubiquitination of DAPK1, leading to its degradation by the proteasome,
thereby acting as a negative regulator of apoptosis. Also acts as a regulator
of endothelial migration during angiogenesis by controlling the activation of
Rho GTPases.
Substrate-specific adapter of a BCR (BTB-CUL3-RBX1) E3 ubiquitin-protein ligase complex involved in interferon response. The BCR(KLHL20) E3 ubiquitin ligase complex mediates the ubiquitination of DAPK1, leading to its degradation by the proteasome, thereby acting as a negative regulator of apoptosis. Also acts as a regulator of endothelial migration during angiogenesis by controlling the activation of Rho GTPases.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
跨膜结构域4亚家族成员2抗体
组织相容性复合物RTF1抗体 Anti-RTF1
MS4A2
Tau微管蛋白激酶2抗体 Anti-TTBK2/SCA11
20号染色体开放阅读框24抗体
CALU ELISA kit
C20orf24
豚鼠白三烯D4(LTD4)elisa分析检测试剂盒
荆豆凝集素1抗体
大鼠钙腔蛋白(CALU)elisa分析检测试剂盒
脂滴相关蛋白TIP47抗体 Anti-TIP47/M6PRBP1
LT-D4ELISAKit
基质细胞衍生因子4抗体(钙结合蛋白) Anti-SDF4
小鼠细胞程序性死亡蛋白1配体1(PDCD1LG1)elisa检测试剂盒
中性粒细胞弹性蛋白酶ELANE抗体 Anti-Neutrophil
Elastase/ELANE
冰冻切片过氧化酶活性(pH5.5)染色试剂盒
G蛋白P21 RAC2抗体 Anti-RAC2
人白介素-1β前体(Pro-IL-1β)elisa分析检测试剂盒
Ulex Europaeus
Lectin 1
大鼠丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)elisa检测试剂盒
防御素β-133/β-defensin 133抗体
Ran结合蛋白11抗体
DEFB133
IPO11
肌聚多糖-β抗体 Anti-SGCB/SGC
β淀粉样前体蛋白结合蛋白2抗体
跨膜受体蛋白Notch-1抗体 Anti-Notch1/MOTC
APBA2
Kelch样蛋白20抗体丝氨酸蛋白酶37抗体 Protease serine 37 研究领域;细胞生物 信号转导 泛素 PUSL1蛋白抗体 PUSL1 研究领域;转录调节因子 表观遗传学 4号染色体开放阅读框27抗体 C4orf27 研究领域;心血管 细胞生物 发育生物学 钾离子通道四聚体结构域蛋白5抗体 KCTD5 研究领域;细胞生物 通道蛋白