一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008680 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008680 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008680 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:GKAP1
中文名称:G激酶锚定蛋白1抗体
别 名;cGMP dependent protein kinase anchoring
protein of 42 kDa; cGMP-dependent protein kinase-anchoring protein of 42 kDa; G
kinase anchoring protein 1; G kinase-anchoring protein 1; gkap1; GKAP1_HUMAN;
GKAP42.
研究领域;细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Dog, Horse, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;42kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human GKAP1: 121-220/366
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a protein that is highly similar to the mouse cGMP-dependent protein kinase anchoring protein 42kDa. The mouse protein has been found to localize with the Golgi and recruit cGMP-dependent protein kinase I alpha to the Golgi in mouse testes. It is thought to play a role in germ cell development. Transcript variants encoding different isoforms have been found for this gene.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
组蛋白H2A/S抗体
炎症因子3抗体(穿透素) Anti-PITX3
HIST1H2AH
5-羟色胺受体3A抗体 Anti-5HT3A Receptor/SR-3A
5-羟色胺受体1E抗体
Mouse Anti-Human
IgG H&L / Cy5
5HT1E Receptor
胃肠肽SPINK4抗体
黑素细胞特异性转运蛋白抗体
Cy5标记的小鼠抗人IgG H&L
大鼠芳烃受体核转位因子样蛋白1(ARNTL)elisa检测试剂盒
SPINK4
肠致病性大肠杆菌(Enteropathogenic E. coli)鉴定
人apelin 12(AP12)elisa分析检测试剂盒
人促肾上皮质释放(CRH)elisa分析检测试剂盒
小鼠可溶性瘦素受体(sLR)elisa分析检测试剂盒
小鼠转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβR2)elisa检测试剂盒
sLRELISAKit
P protein
AP12ELISAKit
钙粘附蛋白9抗体
大鼠F-肌动蛋白elisa分析检测试剂盒
Cadherin 9
Rat F-actin ELISA
Kit
肿瘤坏死因子受体相关因子1抗体 Anti-TRAF1
人谷氨酸脱羧酶65(GAD65)抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒
上皮特异性ETs转录因子抗体 Anti-PDEF/SPDEF
HumanGAD65antibodyIgGELISAKit
G激酶锚定蛋白1抗体MAP激酶相互作用丝氨酸/苏氨酸激酶2抗体 MNK2 研究领域;细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶 乳腺癌细胞3抗体 DEPDC1B/BRCC3 研究领域; 细胞生物 信号转导 G蛋白信号 核孔复合体蛋白抗体 NUP107 研究领域;染色质和核信号 神经生物学 表观遗传学
转录因子HELT蛋白抗体 HELT 研究领域;细胞生物 发育生物学 神经生物学 信号转导 干细胞 转录调节因子