一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008366 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008366 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008366 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:GPRASP2
中文名称:G蛋白偶联受体GPRSP2蛋白抗体
别 名;FLJ35662; FLJ37327; G-protein coupled
receptor-associated sorting protein 2; GASP-2; GASP2; GPRASP2; GASP2_HUMAN.
研究领域;细胞生物 信号转导 G蛋白偶联受体 G蛋白信号
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;94kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human GPRASP2: 201-300/838
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
G protein-coupled receptors play a role in many different stimulus-response pathways. G protein-coupled receptors mediate extracellular signals into intracellular signals (G protein activation). They respond to a wide variety of signaling molecules, including hormones, neurotransmitters and other proteins and peptides. GASP-2 (G protein-coupled receptor associated sorting protein 2), also known as GPRASP2, is an 838 amino acid protein that regulates a number of G-protein coupled receptors, such as CT-R (calcitonin receptor) and mAChR M1 (muscarinic acetylcholine receptor M1), through interactions with their cytoplasmic tails. Expressed primarily in brain, GASP-2 is a member of the GPRASP family and forms a complex with Huntingtin, with which it is thought to influence receptor trafficking.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
驴黄体生成素(LH)elisa分析检测试剂盒
脑红蛋白/神经血红蛋白/神经球蛋白抗体 Anti-NGB/neuroglobin
LH ELISA Kit
磷酸化Smad2抗体 Anti-phospho-Smad2
(Ser465)
人登革热(DF)抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒
Rabbit Anti-Rat
IgM / PE-Cy5.5
HumanDFIgGELISAkit
胎盘蛋白6抗体
粘蛋白-1抗体
PE-Cy5.5标记的兔抗大鼠IgM
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶2A6(COUMARIN)活性
PL6
纯化线粒体蛋白质浓度定量测定试剂盒
人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)elisa分析检测试剂盒
大鼠磷酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)elisa检测试剂盒
猪D-乳酸脱氢酶(D-LDH)elisa分析检测试剂盒
四、细胞凋亡整体解决方案——Apoptosis
D-LDHELISAKit
MUC1
αNAGELISAKit
22号染色体开放阅读框45抗体
大鼠泛素激活酶(E1/UBAE)elisa分析检测试剂盒
C22orf45
E1/UBAE ELISA Kit
色氨酸相关蛋白3抗体 Anti-TRPC3
山羊骨保护素(OPG)elisa分析检测试剂盒
中间丝相关蛋白抗体 Anti-Repetin
OPGELISAKIT
G蛋白偶联受体GPRSP2蛋白抗体低密度脂蛋白受体相关蛋白12抗体(抑制蛋白7) LRP12 研究领域; 心血管 信号转导 血管生成素样蛋白3抗体 ANGPTL3 研究领域; 心血管 细胞生物 信号转导 生长因子和 血管内皮细胞 新陈代谢 囊泡转运蛋白SFT2C抗体 SFT2C 研究领域;细胞生物 转运蛋白 GBT1蛋白抗体 Transducin alpha 研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 G蛋白信号