一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008862 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008862 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008862 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:GPR49
中文名称:G蛋白偶联受体49抗体
别 名;LGR5; G protein coupled receptor 49; G-protein
coupled receptor 49; G-protein coupled receptor 67; GPCR GPR49; G protein
coupled receptor 67; FEX; g protein-coupled receptor fex; G-protein coupled
receptor HG38; GPR 49; GPR 67; GPR49; GPR67; Leucine rich repeat containing G
protein coupled receptor 5; HG 38; HG38; LGR5_HUMAN; MGC117008; Leucine-rich
repeat-containing G-protein coupled receptor 5; LGR 5; Orphan G protein coupled
receptor HG38.
研究领域; 信号转导 干细胞 细胞凋亡 G蛋白偶联受体 G蛋白信号
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, (predicted: Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit,
Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=3μg/Test IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;98kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from mouse GPR49: 810-907/907
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The protein encoded by this gene is a leucine-rich repeat-containing receptor (LGR) and member of the G protein-coupled, 7-transmembrane receptor (GPCR) superfamily. The encoded protein is a receptor for R-spondins and is involved in the canonical Wnt signaling pathway. This protein plays a role in the formation and maintenance of intestinal stem cells during postembryonic development. Several transcript variants encoding different isoforms have been found for this gene. [provided by RefSeq, Sep 2015]
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
Smad4抗体 Smad4
GLP1类似蛋白Exendin4抗体 Exendin 4
Toll样受体4(CD284)抗体 TLR4
G蛋白通路抑制物蛋白2抗体 GPS2
透明质酸酶2/玻璃酸酶2抗体 Hyaluronidase2
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微管蛋白α/Tubulin α抗体 Tubulin, Alpha 4a
大鼠血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1)elisa检测试剂盒
非受体性蛋白酪氨酸激酶ETK抗体 BMX
印迹AP-BCIP/NBT底物显色试剂盒
结合珠蛋白家族3A1抗体 SCGB3A1
石蜡切片组织MYC蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
AF488标记人CD56 (NCAM)单克隆抗体 human CD56
(NCAM)/AF488
小鼠球蛋白G(IgG)elisa检测试剂盒
8号染色体开放阅读框45抗体 C8orf45
组织样品组织K(CATHEPSIN
K)活性比色法定量检测试剂盒
巨噬细胞炎性蛋白15 CCL15
人多球蛋白受体(poly-IgR)elisa分析检测试剂盒
富含亮氨酸重复蛋白30抗体 LRRC30
大鼠肝细胞生长因子(HGF)elisa检测试剂盒
乙酰胆碱酯酶相关胶原蛋白多肽抗体 COLQ
马17羟孕酮(17-OHP)elisa检测试剂盒
吲哚1抗体 INDOL1
γ谷氨酰基转移酶(GGT)定量检测试剂盒
鸟嘌呤核苷酸结合蛋白2抗体 GNL2
小鼠肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)elisa检测试剂盒免费代测
蒙蛋白抗体 Pokemon/ZBTB7A
大鼠α1微球蛋白(α1-MG)elisa检测试剂盒
G蛋白偶联受体49抗体磷酸化p21激活激酶1/2抗体 Phospho-PAK1 (Ser199 + Ser204) + PAK2 (Ser192 + Ser197) 产品类型磷酸化抗体 CD79A单克隆抗体 CD79A 研究领域; 干细胞 细胞类型标志物 细胞 b-细胞 心脏钙粘蛋白抗体 H
Cadherin 研究领域; 心血管 细胞生物 信号转导 细胞粘附分子 补体C8β链抗体 Complement factor 8 beta 研究领域;细胞生物 及病毒 细胞膜蛋白