一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012452 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012452 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012452 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:P2Y11
中文名称:G蛋白偶联嘌呤受体p2y11抗体
别 名;P2RY11; P2Y purinoceptor 11; P2Y11; P2Y11
receptor; P2Y11_HUMAN; Purinergic receptor P2Y G protein coupled 11; Purinergic
receptor P2Y11.
研究领域;细胞生物 神经生物学 通道蛋白 细胞膜受体 G蛋白偶联受体 G蛋白信号
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Pig, Cow, Horse, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;40kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human P2Y11: 71-170/374 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
P2Y purinoceptor 11 (P2Y11) is a 374 amino acid protein belonging to the G-protein coupled receptor one family. P2Y11 is a multi-pass cell membrane protein that acts as a receptor for both ATP and ATD coupled to G proteins. Due to these interactions, P2Y11 is involved in phosphatidylinositol-calcium and adenylyl cyclase pathways. Induced by DMSO and retinoic acid, P2Y11 is highly expressed in spleen tissue. A putative trans-splicing event involving the gene that encodes P2Y11 and an upstream gene encoding PPAN has been found to result in a fusion protein, designated PPAN-P2RY11.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
核仁结构域蛋白NOM1抗体 NOM1
半胱胺酸蛋白酶蛋白14抗体 Caspase-14 p10
核转运蛋白β3抗体 Karyopherin beta 3
补体C3IP1抗体 C3IP1
轴抑制蛋白2抗体 Axin 2
大鼠钙卫蛋白(CALP)elisa检测试剂盒
转录因子HES6抗体 HES6
细胞白细胞介素-1β转换酶(ICE)活性荧光淬灭法定量检测试剂盒
磷酸化肌萎缩相关蛋白DAG1抗体 phospho-DAG1 (Tyr892)
细胞核膜蛋白提取试剂盒50T
蛇毒巴曲酶/类凝血酶抗体 Batroxobin
人儿茶酚抑素elisa检测试剂盒
NK细胞抑制性受体3DL1(CD158e)抗体 KIR3DL1
大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)elisa检测试剂盒免费代测
Muellerian缪勒管抑制因子抗体 AMH
小鼠opiorphin(opiorphin)elisa检测试剂盒
神经细胞膜糖蛋白M6b GPM6B
DNA Ladder 22000
60T
磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1重组兔单克隆抗体 Phospho-Rb (Ser807)
TNF ALPHA蛋白表达西方杂交分析试剂盒
CRYM蛋白抗体 mu Crystallin
兰花Lndeman培养基
DNAJC25蛋白抗体 DNAJC25
土壤全氮含量测定
小鼠抗人CD4单克隆抗体 human CD4
大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)elisa检测试剂盒
锌指蛋白263抗体 ZNF263
树脂法微量全血DNA纯化试剂盒
G蛋白偶联嘌呤受体p2y11抗体通用转录因子GTF2B抗体 GTF2B 研究领域;细胞生物 转录调节因子 表观遗传学 SARS冠状病毒2 Spike S1抗体 SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike S1 研究领域;及病毒 AF680标记的白细胞共抗原CD45抗体 CD45,
Alexa Flour 680 conjugated 抗体来源;Rabbit 卷曲蛋白FZD7抗体 Frizzled 7 研究领域; 细胞生物 信号转导 转录调节因子