一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ013002 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ013002 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ013002 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:GTP binding protein REM1
中文名称:GTP结合蛋白REM1抗体
别 名;Rad and Gem related GTP binding protein; GES;
GTP binding protein REM; GTP binding protein REM 1; GTP binding protein REM1;
GTPase GES; GTPase regulating endothelial cell sprouting; Rad and Gem like GTP
binding protein 1; RAS (RAD and GEM) like GTP binding; RAS like GTP binding;
RAS like GTP binding protein REM; REM 1; REM1; E030011C07Rik; RP23-35I8.9;
GD:REM; MGC114556; MGC48669; OTTMUSP00000016855; REM1_HUMAN.
研究领域;心血管 细胞生物 信号转导 生长因子和 转录调节因子 通道蛋白 血管内皮细胞 G蛋白信号
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Dog, Cow, Horse,
Rabbit, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;33kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide
derived from human REM/GTP binding protein REM1: 221-298/298
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
REM (Rad and Gem related GTP binding protein) is a member of the Rad/Gem/Kir subfamily of Ras-like GTPases and shares with other members of this subfamily some unusual structural features. Among these are nonconservative amino acid substitutions within guanine nucleotide binding and hydrolysis domains, unique effector domains, extended N- and C-termini, and a conserved C-terminal sequence thought to mediate membrane association but lacking a classical isoprenylation motif. REM, with a predicted molecular weight of 32.9 kDa, is most highly expressed in cardiac muscle and is expressed at more moderate levels in lung, kidney and skeletal muscle. REM is phosphorylated in vivo and has been shown to interact with several 14-3-3 isoforms. It has been reported that the GTP-bound form of a related Ras-like GTPase, GEM/kir, inhibits high-voltage activated Ca2+ channel activities by interacting directly with the ?subunit. The reduced channel activities are the result of a decreased a-subunit expression at the plasma membrane. This inhibition of L-type Ca2+ channels prevents Ca2+-triggered exocytosis in hormone-secreting cells. There are data that suggest that REM similarly regulates Ca2+ channel expression.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
APC标记小鼠CD107a单克隆抗体 mouse
CD107a/APC
早老素蛋白-1抗体 presenilin 1
B7H6蛋白抗体 B7-H6
中心体蛋白110抗体 CP110
跨膜蛋白132A抗体 TMEM132A
大鼠尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)elisa检测试剂盒
酪氨酸蛋白激酶NKF3抗体 NKF3 kinase family member
鞭毛(FLAGELLA)染色试剂盒
Kelch样蛋白15抗体 KLHL15
动物结组织细胞分离培养试剂盒
X染色体开放阅读框26抗体 CXorf26
兔p物质(SP)elisa检测试剂盒
细胞角蛋白85抗体 KRT85
即用型2 x YT培养基 5个/包
细胞毒颗粒相关蛋白TIA-1抗体 TIA1
小鼠干燥综合征抗原B(SSB)elisa检测试剂盒
β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白2抗体 APPBP2
大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)elisa检测试剂盒
LENG9蛋白抗体 LENG9
酵母钾离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒
驱动蛋白家族蛋白7抗体 KIF7
果菜(folic acid)含量比色法定量检测试剂盒
热休克蛋白75抗体 TRAP1/HSP75
小鼠Tau蛋白elisa分析检测试剂盒
甘胺酸-N-酰基转移酶抗体 GLYAT
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)elisa检测试剂盒
干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白1B抗体 IFIT1B
HISTONE H3蛋白表达西方杂交分析试剂盒
GTP结合蛋白REM1抗体Ⅰ型补体受体(C3b/C4b受体)抗体 CD35 细胞膜受体 细胞 t-细胞 b-细胞 紧密连接蛋白抗体 Occludin 抗体来源;Rabbit TRIM16L蛋白抗体 TRIM16L 研究领域;细胞生物 细胞毒性受体NK-p30(CD337)抗体 NCR3 干细胞 细胞表面分子 自然杀伤细胞 细胞