一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008028 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008028 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008028 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:FAM154A
中文名称:FAM154A蛋白抗体
别 名;Protein FAM154A; 4930500O09Rik; C9orf138;
Family with sequence similarity 154 member A; FLJ35283; Hypothetical protein
LOC158297; MGC35182; F154A_HUMAN.
研究领域; 细胞生物 发育生物学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Dog, Cow, Horse,
Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;55kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human FAM154A: 101-200/474
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Chromosome 9 consists of about 145 million bases and 4% of the human genome and encodes nearly 900 genes. Considered to play a role in gender determination, deletion of the distal portion of 9p can lead to development of male to female sex reversal, the phenotype of a female with a male X,Y genotype. Hereditary hemorrhagic telangiectasia, which is characterized by harmful vascular defects, is associated with the chromosome 9 gene encoding endoglin protein, ENG. Familial dysautonomia is also associated with chromosome 9 though through the gene IKBKAP. Notably, chromosome 9 encompasses the largest interferon family gene cluster. Chromosome 9 is partnered with chromosome 22 in the translocation leading to the aberrant production of BCR-ABL fusion protein often found in leukemias. The FAM154A gene product has been provisionally designated FAM154A pending further characterization.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
磷酸化肌原调节蛋白抗体 phospho-MyoD1
(Ser200)
Western细胞裂解液100ml
磷酸化嗜中性粒细胞胞浆因子1抗体 phospho-NCF1 (Ser359)
小鼠甲状旁腺素受体2(PTHR2)elisa检测试剂盒
CSMD3蛋白抗体 CSMD3
植物线粒体形态染色试剂盒
DNAJC4蛋白抗体 DNAJC4
蔗糖磷酸合成酶(SPS)测试盒
神经外营养蛋白1抗体 NXPH1
人甘露糖(Mannose)elisa检测试剂盒
小鼠抗人CD90单克隆抗体 human CD90/Thy-1
大鼠糖类抗原199(CA199)elisa检测试剂盒
丙酮酸脱氢酶激酶功酶3抗体 PDK3
大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)elisa检测试剂盒
半胱胺酸蛋白酶蛋白-6前体蛋白抗体 Caspase-6
人Toll作用蛋白(TOLLIP)elisa分析检测试剂盒
锌指蛋白271抗体 ZNF271
组织络磷酸酶(TP)活性比色法定量检测试剂盒
生物素蛋白连接酶抗体 HLCS
小鼠胎盘生长因子(PLGF)elisa检测试剂盒
NIFK蛋白抗体 NIFK
植物细胞周期G0期步(SYNCHRONY)处理试剂盒
p21蛋白抗体 CDKN1A/p21
β-淀粉酶测试盒
转录因子E2F-2抗体 E2F2
组织半胱(cysteine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒
滋养层细胞抗原3β-HSD抗体 HSD3B1
小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)elisa检测试剂盒
FAM154A蛋白抗体热休克蛋白58抗体 Cornulin 研究领域; 细胞生物 信号转导 细胞粘附分子 KIF20A单克隆抗体 KIF20A 抗体来源;Mouse 坏死因子受体超家族成员5抗体 CD40/TNFRSF5 研究领域;心血管 细胞生物 干细胞 细胞表面分子 细胞 b-细胞 冠状病毒抗体 SARS
putative orflab polyprotein 研究领域;及病毒