一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006847 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006847 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006847 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:CD97
中文名称:CD97抗体
别 名;CD97 antigen subunit beta; Leukocyte antigen
CD97; CD 97; CD97; CD97 antigen; CD97 molecule; CD97_HUMAN; Leukocyte antigen
CD97; Seven span transmembrane protein; Seven transmembrane helix receptor;
Seven transmembrane heterodimeric receptor associated with inflammation; TM7LN
1; TM7LN1.
神经生物学 细胞膜受体 细胞粘附分子 G蛋白偶联受体 细胞表面分子 糖蛋白
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1μg/Test
IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;34/92kDa
细胞定位;细胞膜 细胞外基质 分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human CD97 antigen subunit beta: 741-835/835
<Cytoplasmic>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a member of the EGF-TM7 subfamily of adhesion G protein-coupled receptors, which mediate cell-cell interactions. These proteins are cleaved by self-catalytic proteolysis into a large extracellular subunit and seven-span transmembrane subunit, which associate at the cell surface as a receptor complex. The encoded protein may play a role in cell adhesion as well as leukocyte recruitment, activation and migration, and contains multiple extracellular EGF-like repeats which mediate binding to chondroitin sulfate and the cell surface complement regulatory protein CD55. Expression of this gene may play a role in the progression of several types of cancer. Alternatively spliced transcript variants encoding multiple isoforms with 3 to 5 EGF-like repeats have been observed for this gene. This gene is found in a cluster with other EGF-TM7 genes on the short arm of chromosome 19. [provided by RefSeq, Jun 2011].
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
细胞信号转导分子Smad-1抗体 SMAD1
鱼肝油维生素A含量荧光定量检测试剂盒
限制过度增殖相关蛋白EML4抗体 EML4
小鼠Slit源物3(Slit3)elisa检测试剂盒
α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体 AMACR
细胞基质金属9(MMP9)原位明胶酶谱法(in situ ?zymography)荧光染色试剂盒
δ样蛋白4抗体 DLL4
小鼠腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)elisa分析检测试剂盒
中胚层诱导早期反应蛋白2抗体 MIER2
人apelin 13(AP13)elisa分析检测试剂盒
ATP依赖解旋酶ERCC6抗体 CSB
大鼠高香草酸(HVA)elisa检测试剂盒
链霉素抗体 streptomycin
α-酮戊二酸含量测试盒
辣椒素受体抗体 TRPV1
鸡分泌型球蛋白A(SIgA)elisa分析检测试剂盒
B细胞链接激活蛋白抗体 NTAL
组织锂(lithium)化学比色法定量检测试剂盒
抑制基因LPP2抗体 VANGL1
小鼠肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)elisa分析检测试剂盒
干扰素α2b抗体 Interferon alpha 2b
小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)elisa检测试剂盒
孤儿核受体抗体 RORC
大鼠脑红蛋白(NGB)elisa检测试剂盒
KMT5A单克隆抗体 KMT5A
大量蓝藻菌基因组DNA氯化铯萃取试剂盒
MAP7D3蛋白抗体 MAP7D3
兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)elisa分析检测试剂盒
CD97抗体卵母细胞分泌蛋白1抗体 OOSP1 研究领域;细胞生物 发育生物学 细胞周期蛋白 FITC标记人CD200单克隆抗体 human CD200/FITC 抗体来源;Mouse 氧化低密度脂蛋白单克隆抗体 ox-LDL 研究领域;心血管 细胞生物 脂蛋白 二酰基甘油脂肪酶β/DAGLβ
抗体 DAGLB 研究领域; 细胞生物 信号转导 新陈代谢