使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆转录）反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。
订购信息：
产品名称：青蟹双顺反子病毒PCR实验试剂
英文名称：Mud Crab Dicistrovirus (MCDV)PCR
货号：BJ-01R3881
产品规格：50T
运输：低温
保存：负20度
有效期：一年
货期：现货
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】：
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
u 运输：采用**或泡沫箱加冰密封进行运输。
本公司产品仅用于科研。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。
组成及试剂配制:
1、 酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
RGX-104 free Acid 100μg Sugammadex sodium 2mg C7ORF49 Human 5mg
AZ505 1mg BM 567 100mg CBB1003 hydrochloride 20mg
S- (+)-Rolipram 20μg Diflumidone (R807) 50mg Desipramine hydrochloride 10mM(in1mLDMSO)
GCN2-IN-6 5μg Roxithromycin 500μg UDP-β-D-Glucose (sodium salt) 5mg
Monomethylsulochrin 10mg Bohemine 20μg ATB-343 5mg
Abz-Gly-Ile-Val-Arg-Ala-Lys(Dnp)-OH 100mg 6-hydroxy Warfarin 100mg tetranor-PGDM 50mg
MI-nc (hydrochloride) 10mg (±)-Ketoprofen-d3 50mg GH Zebrafish Mutant 5mg
NTR 368 10mg TC-E 5002 100mg SJB3-019A 10mg
OICR-0547 5mg GroEL Human 5g Acrp30 Human, Trimeric 100mg
Anemarrhenasaponin I 2mg 15-methyl Palmitic Acid methyl ester 1mg CD5 Human 100mg
Fmoc-D-Asp(OBzl)-OH 10mM(in1mLDMSO) 5-FAM-Amylin (mouse, rat) 10mg Endoglin Human, Sf9 10mg
Etretinate 100μg TAK-960 dihydrochloride 10mM(in1mLDMSO) JAM2 Human, Sf9 1mg
GPR84 antagonist 8 10μg 1-Octanoyl-rac-glycerol 1mg Gypsogenin-3-O-glucuronide 50mg
PtdIns-(4)-P1 (1,2-dioctanoyl) (ammonium salt) 1mg S-(+)-Marmesin ((+)-Marmesin) 10mg MK-2206 dihydrochloride 100μg
Tauroursodeoxycholate dihydrate 100mg GAGA-POZ 5μg Sieber Amide Resin 1mg
青蟹双顺反子病毒PCR实验试剂罗红霉素 英文名称HPLC法含量测定 含量：130557-200502 20mg/支 Hamartin/TSC1 结节性硬化症蛋白1抗体规格: 0.1ml
克拉霉素 英文名称含量测定 含量：130558-200902 20mg/支 phospho-TSC1(Ser505) 磷酸化结节性硬化症蛋白1抗体规格: 0.1ml
柔红霉素 英文名称含量测定 含量：130559-200501 20mg/支 SCHAD/HADHSC 短链L-3羟烷基辅酶A脱氢酶抗体规格: 0.2ml
盐酸表柔比星 英文名称 含量：130560- 20mg/支 SCHAD/HADHSC(mouse, rat) 短链L-3羟烷基辅酶A脱氢酶抗体（小鼠，大鼠）规格: 0.2ml
2-乙基己酸 英文名称GC检查 含量：130561-200702 20mg/支 phospho-TSC1(Thr417) 磷酸化结节性硬化症蛋白1抗体规格: 0.1ml
对硝基苯甲醛 英文名称HPLC系统适应性 含量：130562-200902 20mg/支 Hyaluronidase3 透明质酸酶2/玻璃酸酶2抗体规格: 0.2ml
头孢替安 英文名称含量测定 含量：130565-200902 20mg/支 KCNH1/EAG1 钾离子通道蛋白EAG1抗体规格: 0.1ml
阿洛西林 英文名称含量测定 含量：130566-200601 20mg/支 Anterior Gradient 2 前梯度同源蛋白2抗体规格: 0.1ml
头孢丙烯 英文名称含量测定 含量：130567-200902 20mg/支 HERG/KCNH2/ERG 特异性钾离子通道蛋白抗体规格: 0.1ml