原代细胞培养的具体操作步骤:
1.组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理,使其分散成单个细胞。
2.细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。
3.接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。
4.换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
产品货号
P-X1861
产品规格
5×105
组织来源
肾组织
生长特性
贴壁
细胞形态
梭形、多角形
产品类别
小鼠原代细胞
传代特性
可传1-2代左右
用途
仅供科研
小鼠肾上腺皮质细胞分离自肾上腺组织;肾上腺是人体相当重要的器官,由于位于两侧肾脏的上方,故名肾上腺。肾上腺左右各一,位于肾的上方,共同为肾筋膜和脂肪组织所包裹。左肾上腺呈半月形,右肾上腺为三角形。从侧面观察,腺体分肾上腺皮质和肾上腺髓质两部分,周围部分是皮质,内部是髓质。肾上腺内部是髓质部分,分泌肾上腺素和去甲肾上腺素。这些在应激状态释放增多,能够帮助升高血压,加快心率,升高血糖,动员全身的储备物质,为机体与外界环境的抗争作好充分准备。肾上腺外部是皮质部分,分泌醛固酮、皮质醇和少量的雌雄。醛固酮能够促进小便中尿钾的排出和尿钠的重吸收,正常数量的醛固酮,对维持人体正常血压有重要作用。但是如果过多分泌,会导致高血压和低血钾。皮质醇是人体必需的之一。当人体处于应激状态时,比如感冒,发烧,遇到突发事件的时候,肾上腺皮质分泌大量的皮质醇,这些皮质醇能够动员机体的存储能源,为应对内部或者外部重要事件提供充分的物质准备。当皮质醇缺乏时,机体在遇到重大事件的时候,往往缺乏足够应对能力,容易被病毒或外界压力所击倒。肾上腺产生的雄,对男性来讲,并非必不可少,但是对女性而言,是雄的一个重要来源。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠肾上腺皮质细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:公司实验室分离的小鼠肾上腺皮质细胞经3β-HSD荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传1-2代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
相关产品:
人硬脑膜成纤维细胞 Human primary dura fibroblasts |
小鼠杂交瘤细胞;IIID12 |
兔肠神经胶质细胞 Rabbit primary intestinal neuroglial cells |
小鼠杂交瘤细胞;D11E8A1G5 |
C127 [C-127] (小鼠乳腺肿瘤细胞) (种属鉴定正确) |
人肺小气道上皮细胞 |
小鼠外周血中性粒细胞 |
抗人TATA框结合蛋白交互作用蛋白单抗7 |
MC/CAR (人外周血细胞) |
人硬脑膜成纤维细胞 Human primary dura fibroblasts |
人胚肾二倍体细胞;HEK-2 |
EB病毒转化的人B细胞;KM9401 |
原代培养与传代培养的区别:
1. 细胞来源
原代培养:原代培养是指从生物体组织中直接分离出的细胞进行的培养。这些细胞通常来自活检样本或手术摘除的组织。原代培养的细胞尚未经过任何实验室的人工选择或适应。组织传代培养:传代培养指的是经过初次分离培养后的细胞,在体外环境中经过多次分裂和增殖后的细胞。这些细胞已经适应了人工培养条件,并可以通过传代方式多次增殖。
2. 培养过程
原代培养:原代培养的过程通常包括组织的解离、细胞的分离、种植和培养等步骤。原代细胞培养的目的是获得足够数量的细胞,以进行进一步的实验研究或建立稳定的细胞系。
传代培养:传代培养的过程涉及到将已经适应体外培养条件的细胞从培养容器中分离出来,然后重新种植到新的培养容器中进行进一步培养。传代培养通常需要在细胞达到一定密度或出现接触抑制时进行。
3. 细胞特性
原代培养:原代细胞通常具有更接近自然状态下的生物学特性,包括基因表达、酶活性、信号传导等。这些特性使得原代细胞成为研究生理和病理条件下细胞行为的重要工具。
传代培养:传代细胞由于长期在体外环境中生长,可能会发生一些生物学特性的改变。这些改变可能包括基因表达的变化、细胞形态的变异、生长速率的增加等。因此,传代细胞可能需要进行鉴定和验证,以确保其仍具有所需的生物学特性。
4.培养结果
原代培养:所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大,更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
传代培养:由于细胞已适应体外环境并且增殖速度快,传代培养一般适用于获得大量同种细胞以满足实验需求,如构建组织工程产品、筛选和毒性测试等。5. 应用领域
原代培养:原代细胞通常用于筛选、毒理学测试、模型研究等领域。由于其保留了生物体的自然特性,因此被认为是更接近体内条件的模型系统。
传代培养:传代细胞被广泛用于各种生物学研究,包括基因表达调控、信号转导、细胞周期调控等。传代细胞系的稳定性和一致性使得它们成为研究细胞生物学机制的理想模型。
6. 注意事项
原代培养:需要严格控制无菌条件,避免细胞污染;注意细胞的存活率和纯度,避免其他类型细胞的混杂;以及考虑细胞在体外环境下可能发生的表型和基因型改变。
传代培养:需要关注细胞的生长状态和形态变化,定期检查细胞是否存在污染或变异;注意传代次数,因为过多的传代可能导致细胞老化或转化。
公司正在出售的产品:
锌指蛋白Zdhhc12抗体 ZDHHC-12 |
组织血管紧张素Ⅰ转化酶2(ACE2)活性比色法定量检测试剂盒 |
促性腺释放受体抗体 GnRHR |
人促甲状腺素释放(TRH)elisa生化检测试剂盒 |
肠和大脑特定源蛋白2抗体 Gbx2 |
CaM ELISA Kit |
组织蛋白酶D轻链单克隆抗体 Cathepsin D |
植物钙调素(CaM)elisa生化检测试剂盒 |
锌指蛋白673抗体 ZNF673 |
大鼠白蛋白(ALB)elisa检测试剂盒 |
琥珀酸裂解酶抗体 Argininosuccinate Lyase |
人Toll样受体3(TLR3)elisa分析检测试剂盒 |
核纤层蛋白B(核内参)单克隆抗体 Lamin B (Nuclear Loading Control) |
E3泛素蛋白连接酶MIB1抗体 Mib1 |
p53诱导蛋白3抗体 PIG3 |
磷酸相互作用结构域蛋白1抗体 PID1 |
自噬相关蛋白16A抗体 ATG16L |
磷酸化鸟苷酸转换因子VAV1抗体 phospho-VAV1 (Tyr174) |
PE-Cy7标记人CD235a (GYPA)单克隆抗体 human CD235a (GYPA)/PE-Cy7 |
Ero1-Lβ蛋白抗体 ERO1LB |
生长抑素受体1抗体 Somatostatin Receptor 1 |
鱼巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)elisa分析检测试剂盒 |
/酵母细胞线粒体分离(高纯)试剂盒 |
人内膜异位症患者在位内膜间质细胞永生化细胞;hEM15A |
人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)elisa分析检测试剂盒 |
双特异性磷酸酶抗体13抗体 DUSP13 |
大量腺病毒沉淀法纯化试剂盒 |
蛋白质羰基测试盒 |
人钙转运ATP酶2C型成员1(ATP2C1)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)elisa检测试剂盒免费代测 |
大鼠活化凝血因子X(FXa)elisa检测试剂盒 |
小鼠肾上腺皮质细胞丝状蛋白提取试剂盒(2D电泳用)50T |
原代细胞培养的注意事项:
一、在进行原代细胞培养时,需要注意以下几点:
二、无菌操作:整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。
三、细胞融合和传代:跟踪细胞的融合状态,适时进行传代,避免细胞分化。
四、冷冻保存和复苏:对于需要长期保存的细胞,可以进行冷冻保存,并注意复苏时的操作细节。
五、培养基的选择和更换:根据细胞类型选择合适的培养基,并定期更换以保证营养充足。