原代细胞培养的具体操作步骤:
1.组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理,使其分散成单个细胞。
2.细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。
3.接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。
4.换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
组织来源
脂肪组织
货号
P-X1904
产品规格
5×105
生长特性
贴壁
产品类别
小鼠原代细胞
细胞形态
成纤维细胞样
小鼠前脂肪细胞分离自脂肪组织;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的系统。脂肪组织在体内含有两种主要的细胞:一种是在胞浆内积聚脂滴的成熟脂肪细胞;另一种是虽未在胞浆内积聚脂滴但有这种潜能的前脂肪细胞。前脂肪细胞呈梭形,有分裂和增殖的能力;成熟的脂肪细胞呈圆形,已经失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化前体细胞,与肥胖有着非常密切的关系。前脂肪细胞是一种类成纤维细胞,在演变的过程中不断吸收脂质,终成为成熟的脂肪细胞。前脂肪细胞对外界机械损伤的抵抗力较强,可望成为软组织缺损的有益填充物。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠前脂肪细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:公司实验室分离的小鼠前脂肪细胞经油红O染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
相关产品:
人真皮微血管内皮细胞 Primary human dermal microvascular endothelial cells |
小鼠小肠平滑肌细胞;MUS-M1 |
兔表皮干细胞 Rabbit epidermal stem cells |
抗人pirin单抗杂交瘤细胞;IIIA3bC1E12D1 |
AtT-20 (小鼠垂体瘤细胞) (种属鉴定正确) |
人肝腹水腺癌细胞 |
小鼠嗅上皮细胞 |
抗人ORM1-like2单抗7 |
MCF 10A (人正常乳腺上皮细胞) (STR鉴定正确) |
人真皮微血管内皮细胞 Primary human dermal microvascular endothelial cells |
人胚肾细胞;2V6.11 |
小鼠杂交瘤细胞;EphB2 |
原代培养与传代培养的区别:
1. 细胞来源
原代培养:原代培养是指从生物体组织中直接分离出的细胞进行的培养。这些细胞通常来自活检样本或手术摘除的组织。原代培养的细胞尚未经过任何实验室的人工选择或适应。组织传代培养:传代培养指的是经过初次分离培养后的细胞,在体外环境中经过多次分裂和增殖后的细胞。这些细胞已经适应了人工培养条件,并可以通过传代方式多次增殖。
2. 培养过程
原代培养:原代培养的过程通常包括组织的解离、细胞的分离、种植和培养等步骤。原代细胞培养的目的是获得足够数量的细胞,以进行进一步的实验研究或建立稳定的细胞系。
传代培养:传代培养的过程涉及到将已经适应体外培养条件的细胞从培养容器中分离出来,然后重新种植到新的培养容器中进行进一步培养。传代培养通常需要在细胞达到一定密度或出现接触抑制时进行。
3. 细胞特性
原代培养:原代细胞通常具有更接近自然状态下的生物学特性,包括基因表达、酶活性、信号传导等。这些特性使得原代细胞成为研究生理和病理条件下细胞行为的重要工具。
传代培养:传代细胞由于长期在体外环境中生长,可能会发生一些生物学特性的改变。这些改变可能包括基因表达的变化、细胞形态的变异、生长速率的增加等。因此,传代细胞可能需要进行鉴定和验证,以确保其仍具有所需的生物学特性。
4.培养结果
原代培养:所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大,更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
传代培养:由于细胞已适应体外环境并且增殖速度快,传代培养一般适用于获得大量同种细胞以满足实验需求,如构建组织工程产品、筛选和毒性测试等。5. 应用领域
原代培养:原代细胞通常用于筛选、毒理学测试、模型研究等领域。由于其保留了生物体的自然特性,因此被认为是更接近体内条件的模型系统。
传代培养:传代细胞被广泛用于各种生物学研究,包括基因表达调控、信号转导、细胞周期调控等。传代细胞系的稳定性和一致性使得它们成为研究细胞生物学机制的理想模型。
6. 注意事项
原代培养:需要严格控制无菌条件,避免细胞污染;注意细胞的存活率和纯度,避免其他类型细胞的混杂;以及考虑细胞在体外环境下可能发生的表型和基因型改变。
传代培养:需要关注细胞的生长状态和形态变化,定期检查细胞是否存在污染或变异;注意传代次数,因为过多的传代可能导致细胞老化或转化。
公司正在出售的产品:
OSBPL10 |
碱性磷酸酶(AP)标记的小鼠抗大鼠IgG H&L |
CAB39L |
软骨蛋白样蛋白抗体 |
钙结合蛋白样39抗体 |
KIAA1191 |
小鼠谷胱甘肽S转移酶θ1(GSTθ1)elisa检测试剂盒 |
KIAA1191蛋白抗体 |
氧固醇结合蛋白样10抗体 |
染色体结构维持蛋白4抗体 |
线粒体超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分离试剂盒 |
Mouse Anti-Rat IgG H&L / AP |
酵母核蛋白提取试剂盒50T |
血栓调节蛋白抗体 Anti-Thrombomodulin/CD141 |
人白介素22(IL-22)elisa分析检测试剂盒 |
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SIK2抗体 Anti-SNF1LK2/SIK2 |
组蛋白H3-K9(mono/di/tri)甲基化检测试剂盒 |
蛋白激酶C亚型G抗体 Anti-PKC-γ/SCA14 |
IL-22检测试剂盒 |
孕诱导阻断因子抗体 Anti-PIBF |
食蟹猴C肽(C-Peptide)elisa分析检测试剂盒 |
丝状蛋白提取试剂盒(2D电泳用)100T |
小量腺病毒沉淀法纯化试剂盒 |
人胃癌细胞;MKN-28 |
人钙结合蛋白S100A14 elisa检测试剂盒 |
Cynomologus Monkey C-Peptide ELISA Kit |
POSTN检测试剂盒 |
pJAK3检测试剂盒 |
人骨膜蛋白/成骨细胞特异性因子2(POSTN)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体β(PPAR-B/PPARD)elisa检测试剂盒 |
大鼠P0蛋白(p0)elisa分析检测试剂盒 |
小鼠前脂肪细胞p0 ELISA Kit |
原代细胞培养的注意事项:
一、在进行原代细胞培养时,需要注意以下几点:
二、无菌操作:整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。
三、细胞融合和传代:跟踪细胞的融合状态,适时进行传代,避免细胞分化。
四、冷冻保存和复苏:对于需要长期保存的细胞,可以进行冷冻保存,并注意复苏时的操作细节。
五、培养基的选择和更换:根据细胞类型选择合适的培养基,并定期更换以保证营养充足。