ELISA 试验时,注意事项如下:
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要**价廉、**、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入 。
产品名称:人激肽原ELISA检测试剂盒
英文名称:Kininogen
检测范围:0.5ng/mL~16ng/mL
灵敏度:0.1
产品货号:BJ-H63977
产品规格:48T/96T
产品保存:2-8℃,有效期6个月
主要组成成分:试剂
性状:液体
产品规格:96T/48T
96T指可以做94个标本,2个标准对照
48T指可以做47个标本,1个标准对照
96T-84个样本
48T-42个样本
待检样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等等。
本公司产品仅用于科研实验。
样品收集、处理及保存方法
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内**的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
组成结构:
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内**的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
此IBL试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆,细胞上清中白介素-6的定量检测
试剂盒成分:
1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T
2 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1
3 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1
5 标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1
6 显色剂: TMB底物液 15mL x 1
7 终止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)
维生素A CAS号: 68-26-8 规格: HPLC≥95%;20mg 订购|咨询
羊藿次苷I CAS号: 56725-99-6 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
盐酸野靛碱 CAS号: 规格: HPLC≥99%;20mg 订购|咨询
杨芽黄素 CAS号: 520-28-5 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
鸦胆子素D CAS号: 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
药根碱 CAS号: 3621-38-3 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
香草酸 CAS号: 121-34-6 规格: HPLC≥97%;100mg 订购|咨询
香叶木素 CAS号: 520-34-3 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
蒜氨酸 CAS号: 556-27-4 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
三氯蔗糖 CAS号: 56038-13-2 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
双香素 CAS号: 66-76-2 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
茜素 CAS号: 72-48-0 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
β-蒎烯 CAS号: 18172-67-3 规格: HPLC≥99%;0.5mL 订购|咨询
α-蒎烯 CAS号: 7785-26-4 规格: HPLC≥98%;0.5mL 订购|咨询
尿囊素 CAS号: 97-59-6 规格: HPLC≥99%;20mg 订购|咨询
1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖 CAS号: 14937-32-7 规格: HPLC≥99%;20mg 订购|咨询
人激肽原ELISA检测试剂盒Baird-Parker 琼脂基础 (CM0275) Oxoid
Eosin Methylene Blue Agar, Levine
梭强化培养基 厌氧的培养计数,尤其是食品和临床样品中的梭500g
M17 broth acc.to TERZAGHI M17肉汤 1.15029.0500MERCK默克
DEV nutrient agar for microbiology DEV营养琼脂 1.11471.0500MERCK默克
玫瑰红钠琼脂 250(g)
T1N3肉汤 250(g)
CVT琼脂培养基 250(g)
改良Camp-BAP琼脂基础 250(g)
氯硝胺甘油琼脂基础 (CM0729) Oxoid
110号葡萄球培养基 (CM0145) Oxoid